赛业生物重磅: CRISPR/Cas9 技术进一步升级!

日期: 2016年11月08日


    

赛业生物重磅: CRISPR/Cas9 技术进一步升级!

 

提到基因编辑技术,CRISPR/Cas9 当之无愧是目前生物学领域最耀眼的明星。它简便快捷、无物种限制、靶向精确以及多基因敲除的特性,深受广大科研学者的青睐。此外,技术的不断突破创新以及大牛间的专利之争,CRISPR/Cas9 也一直是国际上讨论的热点。

 

8 月 20 日,来自赛业生物的专家团队正式发布了 CRISPR/Cas9 的重磅突破——CRISPR-Pro 技术!作为 CRISPR/Cas9 技术的升级版,CRISPR-Pro 大片段基因敲除可长达 20 kb,条件性基因敲除长达 4 kb,基因敲入长达 10 kb。当中的核心技术问题,让我们一起捋一捋。

 

CRISPR/Cas9技术是什么?

 

这段引用的概述通俗明了:CRISPR 是规律成簇的间隔短回文重复(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)的缩写。CRISPR 与内切酶 Cas9 是一对好基友,细菌依靠它们组成的防御系统对抗外来侵略者。CRISPR/Cas9 能够在引导 RNA 的指引下,靶标并切割入侵者的遗传物质。也就是说,CRISPR/Cas9 技术是使用一段序列特异性向导 RNA 分子(sequence-specific guide RNA)引导核酸内切酶到靶点处,从而完成基因组的编辑。

 

CRISPR/Cas9的编辑效率如何?

 

根据 Jackson Lab 最新发布的数据(如下图),CRISPR/Cas9 在胜任复杂的基因敲除/敲入中,效率仅为一般或低下。

 

CRISPR/Cas9 编辑

 

CRISPR-Pro技术是如何提高效率?

 

CRISPR-Pro 技术建立在传统 CRISPR/Cas9 技术上,沿用核酸酶介导的基因修饰技术体系,采用独特的受精卵处理方式使受精卵偏好同源重组修复路径,进而提高同源重组效率。Cas9/gRNA 复合物在靶位点进行切割,产生双链断裂(DSB:Double-strand break),迫使细胞进行紧急修复。通常条件下,细胞偏向于使用非同源末端连接(NHEJ:nonhomologous DNA end joining)的方式对断裂的双链进行修复,进而造成靶位点基因的插入/缺失突变。CRISPR-Pro 独特的受精卵处理方式,极大地提高了同源重复修复(HDR:Homology-directed recombination or repair)路径的效率,使得 DNA 大片段敲入(KI)及条件性敲除(cKO)得以实现。

 

CRISPR-Pro技术

 

CRISPR-Pro 技术的优势分析

● 周期短,效率高;

● 高嵌合率,生殖遗传稳定;

● 可实现DNA大片段敲入 (长达 10 Kb);

● 可实现条件性敲除(长达 4 kb);

● 可实现大片段敲除(长达 20 kb)。

 

CRISPR/Cas9与CRISPR-Pro的效率对比:

 

CRISPR/Cas9效率

 

与 Jackson Lab 展示的 CRISPR/Cas9 基因编辑效率相比,赛业生物(Cyagen)CRISPR-Pro 在敲入片段长度与敲入效率方面都更具优势。因此,在胜任较为复杂的基因敲除与敲入,CRISPR-Pro 技术能确保高效,是科研学者的首选! 

 

模式动物完整解决方案:

TurboKnockout基因敲除小鼠:减少两代繁育时间,ES打靶仅需6个月

CRISPR-Pro基因敲除:基因敲除长达20kb,基因敲入长达10kb

人源化小鼠:平台体系成熟,服务于辉瑞、阿斯利康、恒瑞医药等知名药企

转基因小鼠:Nature等顶级期刊引用,年构建高达5000例

 

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