赛业生物重磅： CRISPR/Cas9 技术进一步升级！

赛业生物重磅： CRISPR/Cas9 技术进一步升级！

提到基因编辑技术，CRISPR/Cas9 当之无愧是目前生物学领域最耀眼的明星。它简便快捷、无物种限制、靶向精确以及多基因敲除的特性，深受广大科研学者的青睐。此外，技术的不断突破创新以及大牛间的专利之争，CRISPR/Cas9 也一直是国际上讨论的热点。

8 月 20 日，来自赛业生物的专家团队正式发布了 CRISPR/Cas9 的重磅突破——CRISPR-Pro 技术！作为 CRISPR/Cas9 技术的升级版，CRISPR-Pro 大片段基因敲除可长达 20 kb，条件性基因敲除长达 4 kb，基因敲入长达 10 kb。当中的核心技术问题，让我们一起捋一捋。

CRISPR/Cas9技术是什么？

这段引用的概述通俗明了：CRISPR 是规律成簇的间隔短回文重复（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）的缩写。CRISPR 与内切酶 Cas9 是一对好基友，细菌依靠它们组成的防御系统对抗外来侵略者。CRISPR/Cas9 能够在引导 RNA 的指引下，靶标并切割入侵者的遗传物质。也就是说，CRISPR/Cas9 技术是使用一段序列特异性向导 RNA 分子（sequence-specific guide RNA）引导核酸内切酶到靶点处，从而完成基因组的编辑。

CRISPR/Cas9的编辑效率如何？

根据 Jackson Lab 最新发布的数据（如下图），CRISPR/Cas9 在胜任复杂的基因敲除/敲入中，效率仅为一般或低下。

CRISPR-Pro技术是如何提高效率？

CRISPR-Pro 技术建立在传统 CRISPR/Cas9 技术上，沿用核酸酶介导的基因修饰技术体系，采用独特的受精卵处理方式使受精卵偏好同源重组修复路径，进而提高同源重组效率。Cas9/gRNA 复合物在靶位点进行切割，产生双链断裂（DSB：Double-strand break），迫使细胞进行紧急修复。通常条件下，细胞偏向于使用非同源末端连接（NHEJ：nonhomologous DNA end joining）的方式对断裂的双链进行修复，进而造成靶位点基因的插入/缺失突变。CRISPR-Pro 独特的受精卵处理方式，极大地提高了同源重复修复（HDR：Homology-directed recombination or repair）路径的效率，使得 DNA 大片段敲入（KI）及条件性敲除（cKO）得以实现。

CRISPR-Pro 技术的优势分析

● 周期短，效率高；

● 高嵌合率，生殖遗传稳定；

● 可实现DNA大片段敲入 (长达 10 Kb)；

● 可实现条件性敲除（长达 4 kb）；

● 可实现大片段敲除（长达 20 kb）。

CRISPR/Cas9与CRISPR-Pro的效率对比：

与 Jackson Lab 展示的 CRISPR/Cas9 基因编辑效率相比，赛业生物（Cyagen）CRISPR-Pro 在敲入片段长度与敲入效率方面都更具优势。因此，在胜任较为复杂的基因敲除与敲入，CRISPR-Pro 技术能确保高效，是科研学者的首选！ 

模式动物完整解决方案：

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CRISPR-Pro基因敲除：基因敲除长达20kb，基因敲入长达10kb

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