重组慢病毒包装服务介绍

日期: 2017年06月28日


    

慢病毒包装系统


赛业生物采用第3代重组慢病毒包装系统制备病毒颗粒。为了增加慢病毒的安全性能,病毒制备所必需的元件序列被拆分到4个质粒当中,分别是:


1)1个编码目的基因的慢病毒转移质粒。目的基因两侧各有一个LTR(Iong terminal repeat)序列,LTR序列促使目的基因整合到目的细胞基因组里。为了提高安全性能,转移质粒的3' LTR缺失了部分序列,使得整合后的病毒基因组失去自我复制能力。


2)2个包装质粒。其中一个质粒编码Rev,另外一个质粒编码Gag和Pol。


3)1个编码VSVG包膜蛋白的质粒。


利用上述质粒包装出来的重组慢病毒颗粒,被称为自我失活VSV-G假型慢病毒(self-inactivating VSV-Gpseudotyped Ientivirus)。


每次包装重组慢病毒,包装质粒和编码包膜蛋白的质粒都是固定不变的,变的是编码目的基因的转移质粒。因此,您需要设计的是转移质粒,登陆:www.vectorbuilder.com 即可轻松快捷设计转移质粒!

 

慢病毒包装系统


慢病毒生产


生产携带目的基因的重组慢病毒颗粒,过程如下图:

 

慢病毒生产


首先将转移质粒、包装质粒和包膜蛋白质粒转染到293T细胞。更换新鲜的培养基后,继续培养48^ 72小时。收集培养液,进行离心浓缩后,就可得到转导细胞级别的病毒颗粒。如果您想获得注射动物级别的超纯病毒颗粒,以利用蔗糖超速离心进一步去除杂质,从而获得纯度更高的病毒颗粒。


质量控制


我们会对每一批病毒都进行滴度检测,严格控制质量,让你百分百放心。针对用携带荧光报告基因的转移质粒生产的病毒,我们先用荧光法检测病毒的转导率,如能达到使用要求,再进一步采用qPCR法检测病毒滴度。


服务明细

 

慢病毒服务

 

赛业生物不仅仅提供基因表达慢病毒定制服务,还提供shRNA干扰慢病毒和gRNA慢病毒定制服务。您可根据实验需要,选择一款适合于您的重组慢病毒来开展基因功篦研究工作。


订制病毒从订制转移质粒开始,登陆:www.vectorbuilder.com 即可轻松快捷地设计转移质粒!


基因表达慢病毒载体


shRNA干扰慢病毒载体


gRNA慢病毒载体


案例

 

慢病毒案例


转化、转染和转导分别指的是什么?


转化(transformation)是指使用化学感受态方法或者电转方法将质粒DNA转进E.oli这一事件。转染(transfection)是指使用磷酸钙、脂质体等化学试剂将质粒DNA转进体外培养的哺乳动物细胞这一事件。转导(transduction)是指失活病毒感染体外培养的哺乳动物细胞这一事件。

 

赛业生物提供分子生物学技术服务:

基因调取:中国最大的基因库,小鼠基因2万个,人类基因3万个

载体构建VectorBuilder高通量载体构建平台,2分钟完成在线载体设计

病毒包装慢病毒包装腺病毒包装腺相关病毒包装

 

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