GFP/RFP慢病毒

GFP/RFP慢病毒

慢病毒的介绍
        慢病毒(Lentivirus)载体是以 HIV-1(人类免疫缺陷1型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别于一般的逆转录病毒,它可以有效感染分裂期和非分裂细胞,并且感染效率非常高,是传统方法的数倍甚至数十倍。慢病毒所携带的基因能够整合到细胞基因组中,并且长时间持续稳定表达,同时能够随细胞分裂稳定传递下去,因此成为导入外源基因的有力工具,是目前最受欢迎的基因功能研究工具。
        Cyagen公司采用第三代慢病毒包装系统进行慢病毒包装,第三代慢病毒包装系统由一个目的基因质粒、二个包装质粒、一个包膜质粒组成,具有更好的安全性:
        一、其基因组的3’LTR的增强子功能发生了缺失,从而形成了所谓的“自灭活”(Self-inactivation,SIN),即该病毒基因组整合到细胞基因组后,不会产生新的子代病毒,也降低了对周围基因的意外激活。
        二、去除了Tat基因,代之以异源启动子序列,这样原始的HIV基因组中的9个基因在慢病毒载体中只保留了3个(gag, pol和rev)。病毒包装必需的3个蛋白Gag/Pol, Rev, VSV-G(代替HIV-1的Env)分别独立放置在3个质粒上(pGag/Pol, pRev, pVSV-G),且互相之间没有任何同源序列,大大降低了复制型慢病毒(RCL)的产生几率。

 

               

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