冷冻保存服务

随着转基因、基因敲除、基因敲入、人源化和其他基因修饰动物的大量制作和使用,保存这些重要的动物模型需要大量的人力、财力和空间投入。

冷冻保存技术的出现,为科研学者提供了不必花费昂贵代价维持动物模型核心种群的方法。除此之外,冷冻保存技术还有很多其它优点,如可以避免珍贵的动物模型受到微生物污染;避免受到火灾、洪水和地震等自然灾害毁灭性的打击;更重要的是对于某些品系,可以防止伴随动物代数增加出现的基因停止或改变表达的风险。与活动物的国际运输相比,运输冻存的精子、胚胎或卵巢的成本和风险更低。

赛业生物提供小鼠胚胎冻存和精子冻存服务,不仅可以确保客户种质资源的安全。一旦客户需要使用冻存的种质资源,最快可以4~6周获得冷冻保存的动物资源。

 
(一)胚胎冻存

胚胎冻存是最早的和最安全的保存实验动物品系的方法。胚胎的来源,可以通过超排卵后合笼获得,也可以通过体外受精(IVF)的方式获得。
影响胚胎冷冻保存成功的三个重要方面包括:
①冻存胚胎的数量;
②复苏后存活胚胎的数量;
③胚胎移植后存活的成年动物数量。

 

冻存建议:

建议每个品系冻存约300枚2细胞期胚胎,每管20~30枚胚胎,放入液氮中保存。胚胎冻存期间可根据客户实验需要提供胚胎复苏服务。

 
胚胎冻存技术的流程:

 

 

服务内容:

由客户提供转基因或基因敲除雄鼠,中心负责将该小鼠与超排的C57BL/6交配,取两细胞期胚胎,并采用玻璃化冷冻保存方法进行胚胎冻存,保存在液氮中。

 
技术指标:

客户提供6-10只6-8周龄雄鼠(转基因阳性鼠或基因敲除杂合子/纯合子雄鼠),并提供基因修饰鼠基因型鉴定的引物及条件;中心负责小鼠基因型复检(PCR方法),将超排后的4-6周龄C57BL/6雌鼠与基因修饰雄鼠交配,取2细胞期胚胎,每个品系冻存300枚2细胞期胚胎。

 
(二)精子冻存

精子冻存在保种服务中广泛应用,其优势在于技术成熟,成本低,容易操作等特点。通过无菌手术分离可育雄鼠的附睾,在特定的溶液进行精子的游离,采集边缘活力最好的精子,并加入专用的冷冻保护液,放置于麦管/冻存管冷冻保存在液氮中。

建议每个品系提供至少3只12周至4月龄的可育成年雄鼠,冻存20麦管/冻存管的精液。

 
优势:

1. 保存暂不需要用的品系
2. 减少遗传漂变、防止自发突变导致的遗传性状改变
3. 保证珍贵小鼠品系不会因疾病、天灾人祸的改变而造成太大的损失
每个品系提供3-4只雄鼠,2-6月龄。

 

(三)胚胎和精子复苏服务

服务内容:

客户需要时,我们将冻存的胚胎或者精子进行复苏,将得到的胚胎移植到SPF级假孕的小鼠受体中,得到SPF级的小鼠后代。外来的胚胎(精子)需提供冷冻方法或者复苏方法。

 
技术指标:

中心保存的胚胎(精子)复苏后,提供2只以上SPF级转基因阳性鼠或基因敲除杂合子小鼠,雌雄不限;客户提供的冷冻胚胎复苏移植后,所有出生的仔鼠均提供给客户。
可提供客户相关的鉴定报告。

 

服务周期

9-12周内完成