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DBA/1-hTNF小鼠

产品编号:I001195

品系全称:DBA/1-Tnfem1(hTNF)/Cya

品系背景:DBA/1

 

品系描述

肿瘤坏死因子α (TNF/TNF-α) 基因编码肿瘤坏死因子(TNF)超家族的促炎细胞因子,主要由巨噬细胞/单核细胞在急性炎症期间产生。通过与其受体TNFRSF1A/TNFR1和TNFRSF1B/TNFBR结合,TNF-α调节免疫细胞功能,参与正常炎症反应和免疫反应。TNF-α参与调节包括细胞增殖、分化和凋亡、脂质代谢和凝血在内的多种生物过程。该因子与自身免疫性疾病、胰岛素抵抗、牛皮癣、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、结核病、常染色体显性多囊肾病和癌症等多种疾病相关。TNF-α基因的突变影响脑型疟疾、感染性休克和阿尔茨海默病的易感性 [1-2]。在小鼠中,该基因的缺陷与对细菌感染的应答缺陷、有组织的滤泡树突细胞网络和生发中心形成缺陷以及初级B细胞滤泡缺乏相关。

DBA/1-hTNF小鼠是小鼠Tnf基因人源化模型,通过基因编辑技术将DBA/1背景品系小鼠的Tnf基因替换为包含5'UTR和3'UTR区域的人源TNF基因,可用于类风湿性关节炎(RA)等疾病研究。由于其免疫Ⅱ型胶原蛋白会导致自身免疫反应介导的严重多关节炎,DBA/1小鼠被广泛用于RA模型构建。因此,以DBA/1品系背景构建的DBA/1-hTNF小鼠可用于RA等免疫相关疾病的研究。此外,基于自主研发的TurboKnockout融合BAC重组的技术创新,赛业生物还可提供基于该模型构建的点突变疾病模型,也可针对不同点突变提供定制服务。

 

构建方式

图1. DBA/1-hTNF小鼠基因编辑打靶示意图。通过基因编辑技术,将小鼠Tnf基因组和侧翼序列替换为人源TNF基因组和侧翼序列,人源化区域包含5'UTR和3'UTR。

 

研究应用

  • 类风湿性关节炎(RA)研究;
  • TNF-α信号通路研究;
  • 其他TNF-α相关疾病发病机制和治疗研究。

 

验证数据

  • 人源TNF基因表达的检测

图2. 10周龄雌性DBA/1野生型小鼠和DBA/1-hTNF小鼠胸腺和脾脏中人源TNF基因表达检测。RT-qPCR结果显示,在DBA/1-hTNF小鼠的胸腺和脾脏中均存在人源TNF基因的显著表达,而DBA/1小鼠体内不存在人源TNF基因的表达。(ND:Not detected)

 

  • 鼠源Tnf基因表达的检测

图3. 10周龄雌性DBA/1野生型小鼠和DBA/1-hTNF小鼠胸腺和脾脏中鼠源Tnf基因表达检测。RT-qPCR结果显示,在DBA/1小鼠的胸腺和脾脏中均存在鼠源Tnf基因的表达,而DBA/1-hTNF小鼠体内不存在鼠源Tnf基因的表达。

 

  • LPS诱导后TNF蛋白的表达情况

图4. 10周龄雌性DBA/1野生型小鼠和DBA/1-hTNF小鼠(hTNF)血清中TNF蛋白表达的ELISA检测*。通过腹腔注射1.5mg/kg剂量的LPS诱导小鼠产生TNF蛋白的高表达**,6h后取小鼠血清进行ELISA检测。结果显示,LPS诱导后DBA/1-hTNF小鼠血清中的人源TNF蛋白显著表达,几乎不表达鼠源TNF蛋白。DBA/1野生型小鼠经LPS诱导后其血清中存在鼠源TNF蛋白的显著表达,而人源TNF蛋白的含量极低。

*检测所用人源TNFα蛋白ELISA试剂盒来自Thermo Fisher:Human TNF alpha ELISA Kit, Ultrasensitive(货号:KHC3014);

检测所用小鼠TNFα蛋白ELISA试剂盒来自联科生物(MULTI SCIENCES):Mouse TNF-a ELISA Kit检测试剂盒(EK282/4)。

**LPS是一种内毒素,可用于刺激小鼠进行免疫反应,通过LPS免疫可以加剧关节炎的严重程度 [3]

 

参考文献

[1]Liu ZG. Molecular mechanism of TNF signaling and beyond. Cell Res. 2005 Jan;15(1):24-7.

[2]Kalliolias GD, Ivashkiv LB. TNF biology, pathogenic mechanisms and emerging therapeutic strategies. Nat Rev Rheumatol. 2016 Jan;12(1):49-62.

[3]Hou Y, Lin H, Zhu L, Liu Z, Hu F, Shi J, Yang T, Shi X, Zhu M, Godley BF, Wang Q, Li Z, Zhao Y. Lipopolysaccharide increases the incidence of collagen-induced arthritis in mice through induction of protease HTRA-1 expression. Arthritis Rheum. 2013 Nov;65(11):2835-46.

 

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