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TNF-α人源化小鼠

品系背景:C57BL/6J

 

品系构建策略:

通过基因替换实现TNF-α人源化:小鼠TNF-α基因被人源TNF-α基因取代。hTNF-α的表达受小鼠内源性启动子调控。

 

品系说明:

  • hTNF-α在小鼠体内具有正常的生理表达和调节模式。

  • 小鼠靶基因不表达。

 

研究应用:

  • 本模型可用于评估hTNF-α靶向药物在体内的有效性和安全性。

  • 通常用于自身免疫性疾病和炎症领域。

 

模型验证:

  • TNF-α表达检测

 

图1. LPS处理后mTNF-α和hTNF-α的平均血浆浓度。

用生理盐水 或LPS处理从野生型小鼠(n=2)和hTNF-α小鼠(n=2)收集的血浆样品,通过ELISA测量mTNF-α(A)和hTNF-α(B)的平均浓度。

 

图2. ELISA分析hTNF-α(红色)和mTNF-α(蓝色)的分泌情况。

左图:αCD3/αCD28刺激人外周血单个核细胞(hPBMC);右图:讲野生型小鼠或hTNF-α小鼠的脾细胞用αCD3/αCD28激活(Act)或不做处理(NA)。在αCD3/αCD28处理后,hTNF-α小鼠的外周血单个核细胞分泌hTNF-α,而不分泌mTNF-α。

 

  • 功能检测

 

图3. hTNF-α和mTNF-α的抗增殖活性。

左图:用αCD3/αCD28激活野生型小鼠和hTNF-α小鼠脾细胞,收集上清液来处理L929细胞。与野生型脾细胞上清液相比,用hTNF-α小鼠的脾细胞上清液处理后的L929细胞呈现出TNF-α浓度依赖性的抗增殖表型。右图:用anti-mTNF-α抗体和anti-hTNF-α抗体预处理野生型小鼠和hTNF-α小鼠上清液能够解除对L929的增殖抑制作用。

 

图4. hTNF-α诱导hTNF-α小鼠体内包括mMCP1在内的多种细胞因子的表达。

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