重度免疫缺陷小鼠(C-NKG小鼠)

品系名称:NOD/Shi-Prkdcscid Il2rgem1/Cyagen

简称:C-NKG小鼠

背景:NOD/Shi-Scid

 

C-NKG小鼠是赛业生物通过CRISPR/Cas9 技术在NOD/Shi-Scid背景品系上敲除Il2rg基因自主研发的一种重度免疫缺陷小鼠。C-NKG小鼠缺乏成熟的T、B、NK免疫细胞,补体活性降低,巨噬细胞对人源细胞吞噬作用弱,可高效地移植人造血干细胞(HSC)、外周血单核细胞(PBMC),患者来源的异种移植物(PDX)或成体干细胞和组织,是目前公认的免疫缺陷程度高,用于肿瘤、免疫、自身免疫性疾病、免疫治疗疫苗、GvHD/移植、安全性评估等研究的优秀模型。

 

品系特点:

  • 缺乏成熟的T,B和NK细胞
  • 补体活性降低
  • 巨噬细胞和树突状细胞功能异常
  • 随着年龄的增长,T和B细胞泄漏的发生率极低
  • 淋巴瘤的发生率极低(与NOD scid模型不同),可用于长期和短期实验
  • 不发展糖尿病

 

研究应用:

  • 与NOD/scid小鼠相比,C-NKG小鼠的人体细胞和组织移植存活率显著提高,同时能够植入更高比例的正常或癌变人类细胞和组织。
  • 可高效地移植人造血干细胞(HSC)、外周血单核细胞(PBMC),患者来源的异种移植物(PDX)或成体干细胞和组织。
  • 可用于肿瘤、免疫、自身免疫性疾病、免疫治疗疫苗、GvHD /移植、安全性评估等研究。

 

表型验证:

1. Prkdc基因突变

图1. Prkdcscid突变是由Prkdc基因84号外显子中的TAT→TAA产生的,基因测序结果表明,NKG小鼠携带有Prkdcscid突变。

 

2. Il2rg基因敲除

图2. 对NKG小鼠Il2rg基因进行PCR检测,结果表明NKG小鼠Il2rg基因成功敲除。

野生型条带大小:388bp;敲除部分片段条带大小:1430bp。

 

3. C-NKG小鼠外周血中B、T、NK细胞的检测

图3. C-NKG小鼠外周血中的B、T、NK细胞严重缺失,为重度免疫缺陷鼠。

取BALB/c、 C-NKG小鼠的外周血,对其T 、B和NK细胞的组成进行代表性流式细胞免疫表型分析及统计对比。结果表明 ,与BALB/c小鼠相比,C-NKG小鼠外周血中的B细胞(CD3-CD19+)、T细胞(CD3+CD19-)、辅助性T细胞(CD3+CD4+CD8-)、细胞毒性T细胞(CD3+CD4-CD8+)、NK细胞(CD335+CD3-)几乎完全缺失。

 

4. C-NKG小鼠淋巴组织中B、T、NK细胞的检测

图4.  C-NKG小鼠淋巴组织中的B、T、NK细胞严重缺失,为重度免疫缺陷鼠。

取BALB/c、 C-NKG小鼠的淋巴组织,对其T 、B和NK细胞的组成进行代表性流式细胞免疫表型分析及统计对比。结果表明 ,与BALB/c小鼠相比,C-NKG小鼠淋巴组织中的B细胞(CD3-CD19+)、T细胞(CD3+CD19-)、辅助性T细胞(CD3+CD4+CD8-)、细胞毒性T细胞(CD3+CD4-CD8+)、NK细胞(CD335+CD3-)几乎完全缺失。

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