品系背景： C57BL/6N

品系构建策略：

将hPD-1和hCTLA-4小鼠杂交，得到PD-1和CTLA-4双人源化小鼠模型(hPD-1/hCTLA-4)。

品系说明：

■ PD-1和CTLA-4的胞外结构域完全人源化。

■ hPD-1和CTLA-4在小鼠体内表达具有正常的生理表达和调节模式。

■ 保留靶点和配体的相互作用。

■ 小鼠的免疫系统功能健全。

■ 缺乏小鼠靶基因的表达，从而避免交叉反应。

研究应用：

该模型可用于评估PD-1和/或CTLA-4靶向化合物在免疫健全小鼠体内的药效及安全性。

与人源肿瘤细胞系MC38-hPD-L1联用，构建同源肿瘤模型，以测试靶向人PD-1和人PD-L1的联合疗法的疗效。

模型验证：

图1. 在PD-1/CTLA-4双人源化小鼠中，人源PD-1和CTLA-4再现了野生型小鼠中鼠源PD-1和CTLA-4的表达模式。用αCD3/αCD29激活从野生型小鼠和CTLA-4/PD-1双人源化纯合子小鼠中分离的小鼠脾细胞。在PD-1/CTLA-4双人源化小鼠中，CD4⁺T细胞表达人源PD-1和人源CTLA-4；在WT小鼠中，CD4⁺T细胞表达鼠源PD-1和鼠源CTLA-4。

图2. hPD-1和hCTLA-4在肿瘤浸润淋巴细胞中表达。PD-1和CTLA-4在MCA205小鼠纤维瘤的肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）中的表达结果。分析鼠源和人源的PD-1以及CTLA-4在WT和hPD-1/hCTLA-4双人源化小鼠中的表达情况。

图3. 在野生型小鼠和hPD-1/hCTLA-4纯合子小鼠颅内移植GL261鼠源胶质瘤细胞系，待GL261在小鼠体内成瘤。在野生型小鼠中注射鼠源PD-1单抗抑制瘤体生长延长小鼠寿命，在hCTLA-4/hLAG3纯合子小鼠注射人源PD-1单抗（pembrolizumab）抑制瘤体生长，延长小鼠寿命。

图4. 在野生型小鼠和hPD-1/hCTLA-4纯合子小鼠皮下移植MC38鼠源结直肠癌细胞系，待MC38在小鼠体内成瘤。在WT小鼠中注射鼠源CTLA-4单抗抑制瘤体生长帮助小鼠存活，在hPD-1/hCTLA-4纯合子小鼠注射人源CTLA-4单抗（ipilimumab）抑制瘤体生长，延长小鼠寿命。