IL-4-IRES-eGFP (4get) 小鼠

品系背景:BALB/c 

 

该模型对IL-4分泌细胞的可靠追踪和分类使您能够有效地描绘出Th2免疫应答极化,是一种强大的药物测试工具,能够:

■ 调节由组织驻留巨噬细胞引起的慢性炎症。

■ 研究与过敏性哮喘有关的气道炎症。

这种IL-4报告小鼠模型得到了广泛的使用和验证,已在60多个知名期刊报道过。

 

品系说明:

■ eGFP报告基因忠实地反映了IL-4表达。

■ 内源性IL-4的表达不受插入基因的影响。

 

模型验证:

IL-4是Th2细胞的典型标志物,可诱导幼稚辅助性T细胞分化为Th2细胞。Th2细胞的主要功能为刺激B细胞增殖、分化和产生抗体,与体液免疫相关。与其他现有的通过随机插入产生的IL-4报告小鼠模型相反,该敲入小鼠保留了IL-4的生理表达并且能够监测Th2的活性。

 

内源性IL-4表达无异常:

■ 内源性IL-4表达并具有功能:将报告基因插入内源性IL-4基因座的3'UTR中。

■ 报告基因忠实地反映了IL-4的表达。

 

能很好地追踪Th2极化

■ 可以通过监测eGFP的表达直接检测表达IL-4的细胞(图1)。

■ 免疫系统不受影响:能响应感染或攻击而产生完好的IL-4(图2)。

■ 能很好地监测Th2细胞的迁移和细胞分选。

 

 图1. eGFP的表达与T细胞中表达的IL-4相关,并反映了IL-4的表达水平。

A) 与Th1相反,Th2在4get细胞的eGFP存在的特异性条件下,能够诱导eGFP的大量表达,从而反映了IL-4的表达情况。用PKH26红色荧光标记纯化的幼稚CD4+eGFP-纯合4get T细胞。在CD4+细胞设门后,在存在抗原呈递细胞的情况下,在Th1、中性或Th2条件下培养细胞,并在第4天进行分析。B) 只有在Th2条件下,4get细胞才特异性表达IL-4。通过补体裂解耗尽野生型(空心条)、杂合(阴影条)及纯合(4get /4get,深色条)4get小鼠的脾细胞的CD8+细胞,并在Th1或Th2条件下刺激 5天。 洗涤细胞并再次刺激,并在48小时后收集上清液,通过ELISA分析IL-4和IFN-γ。

 

 

图2. 在受巴西乳杆菌感染的4get小鼠中,4get细胞响应产生IL-4。纯合4get小鼠被巴西乳杆菌感染。 10天后对肺、肠系膜淋巴结(MLN)、外周淋巴结(PLN)和脾脏(SPL)进行FACS分析。在前向和旁向淋巴细胞设门,检测细胞CD4和eGFP的表达。

 

引用文献精选:

1. Mohrs M; Shinkai K; Mohrs K; Locksley RM.2001. Analysis of type 2 immunity in vivo with a bicistronic IL-4 reporter. Immunity 15(2):303-11.

2. Sofi MH; Qiao Y; Ansel KM; Kubo M; Chang CH.2011. Induction and Maintenance of IL-4 Expression Are Regulated Differently by the 3' Enhancer in CD4 T Cells. J Immunol 186(5):2792-9.

3. Wu D; Molofsky AB; Liang HE; Ricardo-Gonzalez RR; Jouihan HA; Bando JK; Chawla A; Locksley RM.2011.Eosinophils sustain adipose alternatively activated macrophages associated with glucose homeostasis. Science 332(6026):243-7.

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