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GITR人源化小鼠

品系背景:C57BL/6N

 

品系构建策略:

在小鼠GITR基因位点敲入人源GITR胞外域序列,保留小鼠胞内域,由小鼠GITR内源启动子驱动,构建嵌合型GITR人源化小鼠模型。

 

品系说明:

  • hGITR在小鼠体内具有正常的生理表达和调节模式。

  • GITR胞外域人源化,利于hGITR靶向药物的识别。

  • 保留小鼠GITR胞内域,保证正常的胞内信号转导。

  • 小鼠靶基因不表达,避免交叉反应。

  • 小鼠的免疫系统功能健全。

 

研究应用:

本模型可用于评估hGITR靶向药物在免疫健全小鼠体内的有效性及安全性。

 

模型验证:

  • GITR表达检测

 

图1. hGITR在免疫细胞上被诱导表达。

使用αCD3/αCD28抗体刺激脾细胞后(2d),流式细胞术检测到hGITR在hGITR小鼠的Treg(CD4+ Foxp3+)、传统CD4+ T细胞(CD3+CD4+)、CD8+ T细胞(CD3+CD8+)和B细胞(CD3- CD19 +)细胞上都有表达。

 

 

图2. hGITR在肿瘤浸润细胞中(TILs)被诱导表达。

从接种MB49膀胱癌细胞的hGITR小鼠体内分离脾细胞和TILs,hGITR在Treg(CD4+ Foxp3+)、传统CD4+ T细胞(CD3+CD4+)、CD8+ T细胞(CD3+CD8+)细胞上都有表达。

 

  • GITR功能检测

 

图3. hGITR对Teff和Treg具有功效。

Treg(CD4+Foxp3+)经小鼠或人源GITRL刺激或不刺激2h后,与CFSE标记的传统CD4+ T细胞(CD4+CD25-)共培养,并用αCD3抗体 +/- 人源GITRL激活。

 

  • 体内药效实验

 

图4. hGITR单抗具有抗肿瘤作用。

野生型小鼠和hGITR小鼠分别接种MB49膀胱癌细胞,αhGITR抗体处理能抑制hGITR小鼠体内肿瘤生长。

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