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LIGHT人源化小鼠

品系背景:C57BL/6N

 

品系构建策略:

在小鼠Light基因位点敲入人源LIGHT胞外域和跨膜域序列,仅保留小鼠胞内域,构建嵌合型LIGHT人源化小鼠模型。

 

品系说明:

  • hLIGHT在小鼠体内具有正常的生理表达和调节模式。

  • LIGHT胞外域人源化,利于hLIGHT靶向药物的识别。

  • 保留小鼠LIGHT胞内域,保证正常的胞内信号转导。

  • 小鼠靶基因不表达,避免交叉反应。

  • 小鼠的免疫系统功能健全。

 

研究应用:

本模型可用于评估hLIGHT靶向药物在免疫健全小鼠体内的有效性及安全性。

 

模型验证:

  • LIGHT表达检测

 

图1. hLIGHT在活化的脾脏T细胞上表达。

IL-2存在时,用αCD3/αCD28抗体激活CD8+ T细胞和脾脏Teff细胞24小时。hLIGHT在hLIGHT小鼠脾脏Teff细胞和CD8+ T细胞上表达,但在野生型小鼠脾脏T细胞中不表达。

 

  • LIGHT功能检测

 

 

图2. hLIGHT刺激增加了hLIGHT小鼠体内T细胞的激活。

用CTV对野生型和hLIGHT小鼠的T细胞进行标记,并加入αmCD3抗体刺激,加入或不加入mLIGHT或hLIGHT或αhLIGHT抗体进行处理。第4天用(A)FACS测量细胞增殖,(B)ELISA实验检测上清液中IL-2的产生情况。

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