与小鼠相比,大鼠在生理特征、形态和基因上更加接近人类,这使得大鼠成为生物医学和临床研究的理想模型。同时大鼠较大的身体和器官尺寸便于多次采样,以及进行体内电生理学、神经外科和神经影像学程序操作。因此,大鼠模型被广泛用于毒理学、畸形学、内分泌学、肿瘤学、神经病学、实验老年学、心血管研究、牙科研究和实验寄生虫学研究。
赛业生物针对超排大鼠胚胎受精比例低而畸形胚胎比例高,卵细胞品系和个体间差异大,核膜和质膜更厚更有弹性导致更难注射等多项难点,不断优化生产过程各个环节,攻克多项技术难关,可实现更复杂的条件性基因敲除大鼠模型创建。赛业生物可为您提供基因敲除、点突变、基因敲入等多种基因编辑大鼠服务,还可为您提供SD、Wistar、Long Evans、F344、Brown Norway大鼠等多种品系选择,致力于为您构建更好的大鼠模型。欢迎拨打400-680-8038或邮件至info@cyagen.com或点击侧边栏在线咨询联系我们。
利用Cre/loxp系统,可以在特定细胞、组织或整个生物体,甚至在特定时间点敲除或表达某个基因,实现对特定基因的时空特异性操作,这对基因功能的研究和人类疾病动物模型的建立都具有深刻影响。 |
条件性敲除:
flox鼠与Cre鼠杂交,对特定基因进行组织特异性或诱导型敲除,例如在KO-first条件性等位基因策略中的应用。
|
|
条件性过表达:
在目的基因前引入loxp-stop-loxp序列,在Cre未表达时,不表达目的基因;当Cre表达时,loxp-stop-loxp序列被删除,目的基因得以表达。
|
|
生成报告鼠来验证Cre鼠的特异性:
比如TdTomato鼠,在正常情况下由于stop的存在并不能表达红色荧光,当与Cre鼠或TAM激活的CreERT2鼠交配后,TdTomato得到表达,就可以在Cre或CreERT2表达的组织中发出红色荧光。
|
研究人员在开发条件性基因敲除(cKO)或条件性基因敲入(cKI)大鼠模型时面临的主要问题是缺乏针对目标靶标的Cre品系。鉴于与大鼠相关的设施费用较高,因此创建任意品系的Cre-lox大鼠都有可能很快面临成本或空间的限制。为了解决这个问题,赛业生物正在着手建立一个Cre模型库,其中包含各种大小鼠品系,以供全球研究人员使用。
alb(Cre Ert2) | myh6(Cre Ert2) | slc6a3(Cre Ert2) | camk2a(Cre Ert2) |
alb(Cre) | myh6(Cre) | slc6a3(Cre) | camk2a(Cre) |
gfap(Cre) | nes(Cre) | nphs2(Cre Ert2) | |
gfap(Cre Ert2) | nes(Cre Ert2) | nphs2(Cre) |
备注:除以上列出的Cre大鼠模型外,如您需要其他品系的大鼠模型,可拨打400-680-8038联系我们,以获取专属的定制服务报价。
考虑到Cre大鼠需要与LoxP大鼠杂交一至两代才能得到条件性基因编辑动物,同时Cre酶也存在效率和一定概率的泄露问题,可能会对科研进度产生影响。因此,目前最为稳妥的策略是在开发Cre和LoxP大鼠的同时,利用AAV病毒先行对已有LoxP大鼠进行组织特异性操作。病毒载体的构建总是要比动物繁殖到可用于实验的数量所需时间要短得多,因此可以通过这种方法尽快对动物的表型进行研究和验证,尽早决定下一步的研究策略和方向,节省科研人员宝贵的时间。 | |
AAV注射所产生的特异性表达并非仅仅只是节省时间的“权宜之计”。由于生命科学研究中体内实验的不确定性,以及目前开发出来的越来越丰富的研究手段,要想研究结果得到认同,多种方法交叉验证也能为自己的论文质量增加砝码。 |