成人脂肪间质干细胞/RFP

None 成人脂肪间质干细胞/RFP HUXMD-01201
产品货号: HUXMD-01201
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价格:
OriCell成人脂肪间质干细胞取自健康成人(18至45岁)抽脂手术所得脂肪组织,拥有强大的自我更新能力并具有多向分化潜能,贴壁培养后使用慢病毒载体转导,带有RFP(红色荧光蛋白)基因。

脂肪间充质干细胞是一种能分化为成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞的多能干细胞。因其具有强大的增殖能力和免疫调节功能,故被广泛应用于组织工程,细胞治疗和基因治疗。

OriCell成人脂肪间质干细胞取自健康成人(18至45岁)抽脂手术所得脂肪组织,拥有强大的自我更新能力并具有多向分化潜能,贴壁培养后使用慢病毒载体转导,带有RFP(红色荧光蛋白)基因。

质量控制:

  • 本产品经过了细菌/真菌,支原体,内毒素检测。
  • 本产品还经过细胞复苏活力检测,细胞周期,分化潜能鉴定。

该产品仅提供给进一步科研使用,不可应用于临床治疗等其他方面。

 

产品特性

  • 操作规范的条件下,本产品有良好的传代能力,至少能传5代。
  • 本产品有良好的分化潜能,能分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞等。
  • 流式检测鉴定,CD29、CD44、CD105为阳性(>70%),CD14、CD45为阴性(<5%)。

 

产品应用领域

目前,成人脂肪间质干细胞/RFP作为一个研究热点被广泛应用于再生医学和组织工程(特别是在骨、心血管和神经系统等疾病领域)。

OriCell 成人脂肪间质干细胞/RFP可作为细胞模型被应用于增殖,移植和分化研究,以及体内外的免疫反应的鉴定。

 

处理原则

  1. 要在无菌的条件下处理该产品。
  2. 成人脂肪间质干细胞一旦培养起来,请冻存一部分细胞作为备份。

注意:成人脂肪间质干细胞/RFP能被冻存或复苏至少一次。

  1. 我们强烈建议用于科研的细胞代次不超过10代。
  2. 我们建议一般细胞接种密度是5-4.0×104个活细胞/cm2,具体数量请根据细胞状态加以调整。

 

注意:我们强烈建议使用OriCell培养基和其他相关试剂以达到最理想的培养效果。

 

OriCell成人脂肪间质干细胞/RFP的复苏和培养

所需试剂

  • OriCell成人脂肪间质干细胞完全培养基(货号:HUXMD-90011)

成人脂肪间质干细胞/RFP的复苏和培养

  1. 准备好37℃水浴。
  2. 准备好成人脂肪间质干细胞完全培养基,温育到37℃。
  3. 在15 mL离心管中加入9 mL完全培养基。
  4. 从液氮中取出冻存的脂肪间质干细胞/RFP,立即放入-80℃冰箱(目的是让进入冻存管的液氮稍加挥发)。
  5. 在-80℃放置2-3 min后,取出冻存细胞,将冻存管迅速放入37℃温水中,快速晃动使管中内含物尽快融化。仔细观察,待冻存管内含物完全融化后取出。

 

 

注意:

  • 尽可能避免水没过管帽,以减少污染的风险。
  • 要快速完成细胞复苏过程,融化过程时间过长,会造成复苏后的细胞活性较差。
  1. 用75%的酒精消毒冻存管口的外壁。
  2. 在超净台中打开冻存管,用吸管将细胞冻存悬液移入装有完全培养基的离心管中。注意尽量避免产生气泡。
  3. 为了减少细胞损失,往冻存管中加入1 mL完全培养基,稍微吹打,用吸管将这1mL的细胞悬液吸入离心管中,再用吸管将离心管中的细胞轻轻吹打混匀。
  4. 将细胞悬液经250 g(对应于Eppendorf 5810R离心机是1134 rpm)离心5 min。
  5. 尽量去除上清液,向细胞沉淀物加入1-2 mL的完全培养基(已预热到37℃),轻轻吹打均匀。
  6. 将细胞全部接种到1个T25培养瓶或底面积相当的培养器皿中,加入足量的完全培养基。轻轻摇晃细胞培养器皿,使细胞均匀分布。
  7. 放入37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养。
  8. 复苏后的第二天,给复苏的细胞换用新鲜的完全培养基(已预热到37℃)。
  9. 之后,每两天给细胞换新鲜的完全培养基直到细胞达80%-90%的汇合度。
  10. 当细胞达80%-90%的汇合度,进行消化传代。

 

注意:为避免反复热培养基,如果在一次操作中无法用完整瓶培养基,建议分装到适当的无菌容器中。换液只取当天所需培养基量进行预热。