成人脂肪间质干细胞/RFP

脂肪间充质干细胞是一种能分化为成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞的多能干细胞。因其具有强大的增殖能力和免疫调节功能，故被广泛应用于组织工程，细胞治疗和基因治疗。

OriCell成人脂肪间质干细胞取自健康成人(18至45岁)抽脂手术所得脂肪组织，拥有强大的自我更新能力并具有多向分化潜能，贴壁培养后使用慢病毒载体转导，带有RFP（红色荧光蛋白）基因。

质量控制：

• 本产品经过了细菌/真菌，支原体，内毒素检测。
• 本产品还经过细胞复苏活力检测，细胞周期，分化潜能鉴定。

该产品仅提供给进一步科研使用，不可应用于临床治疗等其他方面。

产品特性

• 操作规范的条件下，本产品有良好的传代能力，至少能传5代。
• 本产品有良好的分化潜能，能分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞等。
• 流式检测鉴定，CD29、CD44、CD105为阳性（>70%），CD14、CD45为阴性（<5%）。

产品应用领域

目前，成人脂肪间质干细胞/RFP作为一个研究热点被广泛应用于再生医学和组织工程（特别是在骨、心血管和神经系统等疾病领域）。

OriCell 成人脂肪间质干细胞/RFP可作为细胞模型被应用于增殖，移植和分化研究，以及体内外的免疫反应的鉴定。

处理原则

1. 要在无菌的条件下处理该产品。
2. 成人脂肪间质干细胞一旦培养起来，请冻存一部分细胞作为备份。

注意：成人脂肪间质干细胞/RFP能被冻存或复苏至少一次。

3. 我们强烈建议用于科研的细胞代次不超过10代。
4. 我们建议一般细胞接种密度是5-4.0×10⁴个活细胞/cm²，具体数量请根据细胞状态加以调整。

注意：我们强烈建议使用OriCell培养基和其他相关试剂以达到最理想的培养效果。

OriCell成人脂肪间质干细胞/RFP的复苏和培养

所需试剂

• OriCell成人脂肪间质干细胞完全培养基（货号：HUXMD-90011）

成人脂肪间质干细胞/RFP的复苏和培养

1. 准备好37℃水浴。
2. 准备好成人脂肪间质干细胞完全培养基，温育到37℃。
3. 在15 mL离心管中加入9 mL完全培养基。
4. 从液氮中取出冻存的脂肪间质干细胞/RFP，立即放入-80℃冰箱（目的是让进入冻存管的液氮稍加挥发）。
5. 在-80℃放置2-3 min后，取出冻存细胞，将冻存管迅速放入37℃温水中，快速晃动使管中内含物尽快融化。仔细观察，待冻存管内含物完全融化后取出。

注意：

• 尽可能避免水没过管帽，以减少污染的风险。
• 要快速完成细胞复苏过程，融化过程时间过长，会造成复苏后的细胞活性较差。

6. 用75%的酒精消毒冻存管口的外壁。
7. 在超净台中打开冻存管，用吸管将细胞冻存悬液移入装有完全培养基的离心管中。注意尽量避免产生气泡。
8. 为了减少细胞损失，往冻存管中加入1 mL完全培养基，稍微吹打，用吸管将这1mL的细胞悬液吸入离心管中，再用吸管将离心管中的细胞轻轻吹打混匀。
9. 将细胞悬液经250 g（对应于Eppendorf 5810R离心机是1134 rpm）离心5 min。
10. 尽量去除上清液，向细胞沉淀物加入1-2 mL的完全培养基（已预热到37℃），轻轻吹打均匀。
11. 将细胞全部接种到1个T25培养瓶或底面积相当的培养器皿中，加入足量的完全培养基。轻轻摇晃细胞培养器皿，使细胞均匀分布。
12. 放入37℃、5%CO₂、饱和湿度的培养箱中培养。
13. 复苏后的第二天，给复苏的细胞换用新鲜的完全培养基（已预热到37℃）。
14. 之后，每两天给细胞换新鲜的完全培养基直到细胞达80%-90%的汇合度。
15. 当细胞达80%-90%的汇合度，进行消化传代。

注意：为避免反复温热培养基，如果在一次操作中无法用完整瓶培养基，建议分装到适当的无菌容器中。换液时只取当天所需培养基量进行预热。