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  • 外观判断健康标准:

食欲旺盛,眼睛有神,反应敏捷,体毛光滑,肌肉丰满,活动有力,身无伤痕,尾不弯曲,天然孔腔无分泌物,无畸形,粪便黑色呈麦粒状。

 

  • 小鼠的繁育要点:

选择优质的种鼠

配种及时,小鼠的最佳繁育年龄为2-8月年龄,优先选择2-4月龄的小鼠用于繁殖。

每个基因工程小鼠需要同时保留2代的小鼠,以免其中的一代在繁育中出现问题,导致繁育中断。

详细记录繁育信息,便于分析繁育情况和追溯繁育谱系。

 

  • 母鼠怀孕、分娩的护理:

在怀孕与哺乳期可以喂养含有高蛋白的繁殖饲料。

在小鼠分娩的前后3天尽量不去惊动,有条件的话提前人工“做窝”。

无法自己哺乳的需要寻找带乳鼠。

 

  • 小鼠断乳:

小鼠断乳时间一般为18-21天,由于部分基因工程小鼠发育缓慢/瘦小,断乳时间可以延长到28天。

断乳,只需将母鼠和她哺育的小仔分开单独饲养即可。

断乳后雌雄需要分开饲养。

 

  • 基因工程小鼠不能获得后代的常见解决方法:

检查小鼠的健康情况,尤其是生殖系统是否正常。

定期更换交配的小鼠,增加配种比例,1:2或者1:3

改善饲养环境,提高饮食营养(高营养的饲料或者额外添加营养)。

采用检查阴道栓的方法,观察小鼠是否交配,将已交配的母鼠单独拎出饲养。

必要的情况下可对母鼠进行超排,使母鼠发情并获得更多的卵细胞,提高受孕的概率。

对年龄较大或者外生殖系统有问题的不育雄鼠,在条件允许的情况下,可以考虑采用体外受精的方式。

 

  • 基因工程小鼠出生后代全是阴性:

基因组提取有问题,PCR不能扩增。

PCR引物不正确,不能扩增出目的基因。

PCR体系不合适。

基因不能正常传递/传递过程中丢失。

Cyagen基因定点修饰产品品系名称:由“品系背景、被修饰的基因符号、修饰技术、编号、制作方法、修饰方式、插入基因、实验室代码”内容组成。具体组成规则及示例如下图:

1、品系背景:如果是在单一的小鼠背景上完成的基因修饰,并且在繁育过程中未引入其它品系,由实验鼠的品系全名表示。

2、被修饰的基因符号(斜体):即该产品被修饰的基因。

3、修饰技术(斜体、上标):
tm:对于 ES 细胞打靶途径获得品系,用 tm 表示 targeted mutation。
em:对于 CRISPR/Cas9 或TALEN 等核酸酶系统介导的基因修饰品系,用 em表示endonuclease-mediated mutation。
4、编号(斜体、上标):
这里的编号是指在该实验室中,对该基因修饰的序列号。
5、制作方法(斜体、上标):
大写C代表Cas9方法制作,大写T代表Talen方法制作,大写Z代表ZFN方法制作。
6、修饰方式(斜体、上标):
d代表deletion,in代表insert,d或in后面的数字代表敲除或者敲入片段的大小。
7、插入基因(斜体、上标):
A. 基因敲除:无需加入外源基因的部分,即编号后紧跟实验室代号。例如:C57BL/6-Anpepem1C/Cya。
B. 条件性基因敲除:无需加入外源基因的部分,用flox表示。例如:C57BL/6-Anpepem1Cflox/Cya。
C. 基因敲入:需要在括号内写出插入的外源基因。

8、实验室代码:本司实验室代码为Cya。

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