小鼠表型分析服务

小鼠表型分析服务

赛业生物表型分析平台提供胚胎阶段和成年阶段小鼠和大鼠的表型分析服务。客户可以通过完成一组或多组的分析项目,更好地认识基因和疾病之间的关系,同时也有助于及时发现出现异常表型小鼠模型,保障后续实验的顺利进行。

 

我们根据国际小鼠表型分析联盟(International Mouse Phenotyping Consortium, IMPC)制定的标准化分析策略,提供以下基因敲除小鼠表型分析委托服务:

 

一、胚胎期表型分析项目

1. 胚胎生存能力筛选(Viability Secondary Screen)

此项目的目的是评估纯合胚胎在胚胎发育各个时期的活力、亚活力和致死率。

 

2. 胚胎/胎盘的大体形态学实验(Gross Morphology Embryo/Placenta)

此项目主要用来评估致死品系中肉眼可见的形态学缺陷。

 

3. 胚胎/胎盘的组织病理学实验(Histopathology Embryo/Placenta)

此项目是作为完整小鼠病理表型分析(Complete Mouse Pathology Phenotype)的必测项目,为胚胎组织的收集、修剪和移植提供标准化的参考。

 

4. OPT检测

此项目用于评估胚胎致死品系的形态学缺陷。

 

5. 胚胎LacZ染色实验(Embryonic LacZ Staining)

LacZ基因编码的beta-半乳糖苷酶催化X-gal显蓝色,指示该基因表达。通过检测β-半乳糖苷酶(LacZ)的活性来评估敲除基因的表达情况,一般在E12.5时期进行。

 

6. 断层扫描影像分析(Micro CT)

用Micro CT来检测致死品系的胚胎形态学缺陷,一般在E14.5-E15.5时期检测。

 

二、成年期表型分析项目

1. 常规检测

常规检测包括了体重测量、环境监控、LacZ染色鉴定、存活率统计、纯合子敲除鼠的生殖能力鉴定等,可在成年小鼠的各个时期实施。

 

2. 特殊检测

我们可以根据您的实验目的,为您定制一组或多组分析项目,例如:行为学分析、心血管系统表型分析、代谢学分析等。

 

2.1 行为学分析

2.1.1行为及外观综合检测(Combined SHIRPA and Dysmorphology)

此项目是一个标准化的综合体检法,借助简单的仪器观察小鼠的外观、行为和形态学上的异常。通常在小鼠周龄9周的时候进行检测。

行为及外观综合检测

 

2.1.2 旷场实验(Open Field)

该项目通过记录短时间内小鼠在空旷场地内的行为,评估小鼠的焦虑和探索行为。正常情况下,小鼠倾向于待在场地的边缘而非中央区域。此项目通常在小鼠周龄9周时进行。

 

2.1.3 握力测试(Grip Strength)

该项目主要用于测试小鼠的肌肉强度和抓握能力,可用于评价药物作用、疾病、衰老和神经损伤对肌肉的影响。

握力测试

 

2.1.4 明暗箱测试(Light-Dark Test)

该项目通过记录小鼠在明箱和暗箱活动时长,评估小鼠的焦虑程度。最佳测试周龄为10周。

明暗箱测试

明暗箱测试2

 

2.1.5 震惊反射和前脉冲抑制(Acoustic Startle and Pre-pulse Inhibition (PPI)

在强音刺激前施加一个低强度声音刺激,来检测强音刺激下震惊强度的减弱程度。该项目用于检测小鼠的听觉敏感度和时间分辨率。前者是辨别不同频率和强度声音的能力,后者是听觉系统对声音信号快速变化做出反应的能力。适用于研究精神性疾病,如:精神分裂症、亨廷顿综合征、自闭症等。最佳测试周龄为10周。

震惊反射和前脉冲抑制

震惊反射和前脉冲抑制2

 

2.1.6 惊恐测试(Fear Conditioning)

这一测试项目的目的是评估学习能力和记忆力,通常在11周周龄时进行。

 

2.1.7 迷宫类测试

Y迷宫:这一测试主要用于研究啮齿类动空间工作记忆,通常在11周周龄时进行。

Y迷宫

 

八臂迷宫:也称为辐射迷宫或放射迷宫,是研究啮齿类动物学习记忆能力的常用实验,作用于Y迷宫或T迷宫类似,但相对于这两者而言,迷宫臂的数量大为增加,增加了许多实验选择。

 八臂迷宫

 

高架十字迷宫:是进行焦虑情绪研究的经典试验,利用啮齿类动物喜欢探索但又高空畏惧的心理冲突来评价动物的焦虑情绪。

 高架十字迷宫

 

巴恩斯迷宫:与水迷宫、八臂迷宫一样,是进行啮齿类动物空间记忆能力研究的行为系统。该系统利用啮齿类动物喜欢黑暗幽闭环境的天性建立,对动物的应激性较小。

巴恩斯迷宫

 

水迷宫:小鼠在水中倾向于寻找一个休憩场所,此项目用于评估小鼠的空间学习记忆能力。

水迷宫

 

2.1.8 跑步测试(Rota Rod Test)

将小鼠放在滚筒跑步机上检测协调性和平衡杆。

 

2.1.9 冷热痛觉测试(Pain Test - Hot Plate)

小鼠在脚部和尾部产生痛感时会发生舔足和甩尾,可用来评估痛觉阈值。

 

2.1.10 Bussey-Saksida触控板检测(Bussey-Saksida Touch Systems)

让小鼠通过触屏版操作来获得食物,用来量化小鼠的综合学习能力。

 

2.1.11 悬尾实验(Tail Suspension Test)

该项目用于评估小鼠的抑郁水平。若小鼠被悬尾后表现出静止不动,则抑郁水平较高。

 

2.1.12 探洞实验(Hole-board Test)

通过检测小鼠对新环境的探索行为来评估小鼠对新环境的好奇和探索倾向。小鼠被放入有孔洞的环境时会有探头动作,探头动作的频率和时间可以反应小鼠对新事物的好奇程度。

 

2.1.13平衡木实验(Balance Beam Walking)

该项目用来评估小鼠的平衡功能。

 

2.1.14 穿梭箱实验(Shuttle Box)

观察小鼠在声音、强光和电刺激下的主动回避行为,对小鼠的学习能力做出评价。

 

2.1.15 爬杆实验(Pole Test)

该项目用来评估小鼠的运动协调功能。

 

2.1.16 听觉生理工作站(Auditory Brain Stem Response)

该项目使用麻醉小鼠受声音刺激的诱发电位来评估听觉。

听觉生理工作站

 

2.2 心血管系统分析

2.2.1 心电图检测(Electrocardiogram ,ECG)

借助心电图评估小鼠的心脏功能。

心电图检测

 

2.2.2 超声波检测(Echo)

借助超声波回声检测小鼠的心脏功能。

 

2.2.3 眼睛形态检测(Eye Morphology)

利用特殊仪器检查眼睛的异常,例如用裂隙灯(Slit Lamp)来检查角膜、虹膜形态结构,用眼底相机(Retina Camera)检查视网膜血管形态。

眼睛形态检测

                                 裂隙灯    

                                                                 

                                       裂隙模式                                                                全眼模式

 

   

   

 

眼睛形态检测4

                  Retina Camera眼底相机

 

                                                        拍摄眼底视网膜,血管形态

 

2.2.4 心脏和其他器官重量测量(Heart Weight & Organ Weight)

将心脏离体取出测量重量。

心脏和其他器官重量测量心脏和其他器官重量测量2

 

2.2.5 组织收集和病理学鉴定(Gross Pathology and Tissue Collection)

借助组织病理学仪器对小鼠进行完整的尸体解剖,从内到外完成各组织的形态分析,记录异常变化。

 组织收集和病理学鉴定

 

liver    kidney

                      Liver                                                                 Kidney

colon    skin

                      Colon                                                                      Skin

2.3 代谢学分析

2.3.1 能量代谢监测系统(Comprehensive Laboratory Animal Monitoring System, CLAMS)

通过测量笼内氧气、二氧化碳、水、食物等指标的的变化来评估代谢水平。

能量代谢监测系统

 

2.3.2 体积描记法(Challenge Whole Body Plethysmography)

利用脂多糖(LPS)刺激来记录小鼠的呼吸功能。

 

2.3.3腹腔注射糖耐量实验(Intraperitoneal glucose tolerance test ,IPGTT)

通过空腹注射葡萄糖溶液,评估小鼠胰岛β细胞功能和诊断糖尿病。

腹腔注射糖耐量实验

 

2.3.4 胰岛素测定(Insulin Blood Level)

检测血液中的胰岛素水平来诊断糖尿病。

 

2.3.5 生化检测(Clinical Chemistry)

通过血清的生化组分,分析肝功能、肾功能、血脂、血糖、免疫相关指标等指标。

生化检测1  生化检测2

 

2.3.6 Seahorse Bioscience细胞能量代谢实时测定仪/生物能量代谢测定仪

通过特殊的细胞培养微孔板设计,在测量时临时形成的约5ul微环境中,利用专利光学传感器同步地实时探测溶解氧(OCR)和pH值变化,从而快速了解细胞内两大能量转换途径(线粒体的有氧代谢和糖酵解)的能量代谢状态。在使用XF24的检测过程中,研究人员可以通过预设程序控制在特定时间向待测细胞的培养基中添加多达四种药物,以便研究不同药物对细胞新陈代谢的影响,理解细胞的生物能量变化,快速解析细胞或组织的基础代谢率、ATP转换、膜的完整性、极限呼吸率、线粒体功能,产生氧自由基及超氧化物等有毒物的情况,省时省力,实验数据更科学,更具有说服力。

Seahorse Bioscience细胞能量代谢实时测定仪/生物能量代谢测定仪

 

2.4其他表型分析服务

2.4.1 X-射线(X-ray)

对麻醉小鼠进行X射线检测,诊断异常。

 

2.4.2 身体成分分析(Body Composition-DEXA lean/fat))

用双能X-线吸收仪(Dual Energy X-ray Absorptiometry, DEXA)分析骨矿物成分、骨密度和其他机体成分。

 

2.4.3小动物活体成像系统(IVIS Spectrum Imaging System)

用于荧光素酶(Luciferase)报告系统,萤火虫荧光素酶的活性检测指标,使表达荧光素酶基因的小鼠个体或组织在荧光素底物存在下发出荧光。

 

2.4.4 生物节律测试

Clocklab系统用于记录动物的昼夜节律活动的仪器,通过记录转轮的次数并以图表的形式呈现,分析生物节律的周期,相位等参数。细胞水平上的生物节律测试利用Lumicycle系统,记录细胞水平生物节律昼夜变化,通过长时间记录细胞内Luciferase强度的变化,分析生物节律的周期,相位,振幅等参数。

生物节律测试

 

2.4.5 血常规(Routine Blood Test)

五分类血液分析仪进行血常规检查,提供红细胞,白细胞,血小板等的数量及形态参数

血常规

 

2.4.6 长时间动态活细胞成像

IncuCyte ZOOM基于图像的长时间连续细胞高通量分析

长时间动态活细胞成像1  长时间动态活细胞成像1

 

2.4.7 生殖能力检查

精子活力检测:精子计数、精子活性、精子形态分析、体外受精实验(IVF);

精子活力检测

 

其他:超排排卵数检测、组织学分析、卵泡计数。

 生殖检测            超排排卵数检测

                         生殖能力检测                                                            超排排卵数检测

组织学分析和卵泡计数

                        组织学分析                                            卵泡计数