小鼠原代细胞提取服务

1. 基因敲除小鼠原代细胞提取的应用

原代细胞(Primary cells)是指来源活体组织,经特定分离方法制备而成的初始细胞。原代细胞离体时间短且不经过永生化过程,其生物学特性未发生很大变化,仍保持原有的遗传特征,可更好地反映细胞在体内的生长状态,从而获得与体内生理功能更接近的数据。

从某个特定基因敲除(Knock out,KO)小鼠的特定组织中提取原代细胞,则可直接得到目的基因不表达的原代细胞模型,且与我们在KO小鼠上的研究具有更好的承接性,从而让我们想要证实的实验目的更具有说服性。近年来,多个发表在高分期刊如Scientific Reports的文章均有采用KO小鼠的原代细胞进行实验验证的案例。另外,KO小鼠的原代细胞还可用于药物细胞水平的药物筛选、药物评价等方面。

赛业生物完全性基因敲除小鼠是通过CRISPR/Cas9技术,针对靶基因设计和构建gRNA与Cas9表达质粒,造成目的基因的功能区域被敲除,获得全身所有的组织和细胞中都不表达该基因的小鼠模型。我们目前已经建立了上万种的KO小鼠模型库,可为客户提供多种KO小鼠原代细胞的需求。

    

2. 基因敲除小鼠原代细胞提取服务平台

(1) 现有海量的基因敲除小鼠资源库

超16000品系CRISPR-AI敲除小鼠资源库提供丰富的基因敲除小鼠品系,可大幅度缩短从基因敲除模型构建到原代细胞提取的周期。

赛业生物敲除小鼠资源库包括心脑血管疾病、神经系统疾病、肿瘤、免疫、代谢等多种疾病相关基因的KO小鼠模型。根据研究目的基因不同,我们可提取的原代细胞类型包括:上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞、肌细胞,其中每种细胞包含20~30种不同的组织来源,可最大限度满足不同客户的需求。

 

(2)一站式细胞提取、传代培养及检测平台

赛业生物在细胞生物学领域深耕15年,具备丰富的细胞原代提取、培养及检测经验。原代细胞均取自新鲜组织,每批细胞都经过免疫荧光/流式细胞方法检测细胞的复苏活性和增殖能力等,此外,赛业生物还可提供肿瘤细胞、体细胞常规检测、免疫学检测、组织学检测、干细胞干性分析和血管形成等常规细胞生物学技术服务。

 

(3)平台成熟稳定

赛业生物作为一家综合解决方案提供商,依托超16000品系的KO小鼠资源库、高效且智能化的模式动物定制平台、药物筛选评价小鼠模型平台、成熟的细胞技术服务平台等,建立了多位一体的创新性CRO平台服务网络,以服务于各种领域的科学研究及药物研发筛选,并与全球100多个国家和地区的数万名科学家及企事业单位建立了广泛的合作,产品和技术已直接应用于包括CNS(Cell,Nature, Science三大期刊在内的4800余篇学术论文。赛业生物已获得ISO9001:2015和AAALAC双认证,确保所有产品和技术服务符合国际标准。

 

 

 

3. 服务流程


 

 

4. 成功案例

  

                (卵巢上皮细胞,20X)                                        (动脉内皮细胞,5X)       

  

               (心房肌细胞,5X)                                               (动脉平滑肌细胞,5x)

 

参考文献

1. Selective deletion of endothelial cell calpain in mice reduces diabetic cardiomyopathy by improving angiogenesis. 

Diabetologia. 62(5):860-872. doi: 10.1007/s00125-019-4828-y.

2. TREM2 promotes Aβ phagocytosis by upregulating C/EBPα-dependent CD36 expression in microglia.

Scientific Reports.7:11118 doi: 10.1038/s41598-017-11634-x.

 

 

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