基因敲除载体

为满足不同实验需求，赛业生物可根据您的需要量身定制您专属的CRISPR/Cas载体。只需要您提供靶基因名称、种属、NCBI GeneID等信息，我们就可以为您设计CRISPR/Cas载体。如果您需要靶向指定的转录本或者特殊的DNA区域，我们亦可以帮您实现目标。

我们可以提供下表所示的载体类型与基因元件来构建您的CRISPR/Cas表达载体

载体案例展示（双gRNA慢病毒表达载体）

服务优势 

√ 赛业生物在基因编辑领域有丰富的经验积累，每年构建基因敲除载体超万条，经验丰富的团队可以帮助您快速完成基因修饰载体的设计与构建。

√ 赛业生物不仅可提供单gRNA载体构建，更可提供双gRNA载体构建服务。双gRNA载体可实现片段敲除，敲除高效彻底，并有多种荧光和抗性可供选择，可满足客户多元化的应用需求。

√ 所有CRISPR/Cas载体都经过测序与酶切双重鉴定，以确保产品质量。

服务流程

服务周期

客户提供

客户只需要提供Gene ID或基因名以及种属信息即可。

常见问题分析

问题：质粒载体的转染率低？

对策：优化转染方法，或者使用高效的转基因方法（例如慢病毒），并且可以通过使用抗生素杀死阴性细胞或流式细胞术分选荧光细胞以提高阳性细胞比例。

问题：细胞的单克隆形成率低？

对策：某些细胞单克隆化后难以增殖和形成细胞群落。提高血清浓度、使用正常培养的细胞培养上清、令单克隆与正常培养的细胞进行间接共培养，有助于提高克隆形成率。

问题：筛选出了很多单克隆杂合子，但无法筛选出纯合子？

对策：通常是敲除的靶基因对细胞的生存和增殖有巨大影响，是细胞不可或缺的基因。

问题：基因敲除的单克隆纯合子依然能检测到蛋白表达？

对策：通常是抗体的特异性不够好，能与其他蛋白反应形成假阳性。可以更换不同的抗体进行实验，另外必要时重新鉴定单克隆细胞的基因型。