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肿瘤免疫模型构建平台

赛业生物长期致力于肿瘤细胞模型和动物肿瘤模型的构建,拥有经验丰富的专家团队和成熟稳定的技术平台,可提供免疫细胞治疗相关的各种细胞模型和动物模型。针对CAR-T及其他细胞治疗研究,我们已建立了丰富的肿瘤免疫研究的细胞和小鼠模型库,并为国内外科研院所、医院、制药企业和生物公司提供临床前体内/外药理药效学评价服务。

赛业生物自主研发的C-NKG重度免疫缺陷小鼠,无鼠源T/B/NK细胞,且髓系组分显著缺陷,可用于构建各种CDX模型和人免疫系统重建小鼠模型。

 

服务项目

  • 细胞模型构建
    • CAR-T/CAR-NK等细胞构建
    • 表达肿瘤靶点的细胞模型
    • 荧光素酶标记的肿瘤细胞
    • 其他过表达细胞株

 

  • 体内评价模型构建
模型种类 模型名称

免疫缺陷小鼠模型

C-NKG小鼠; NOD scid小鼠;BALB/c nude小鼠

免疫系统人源化小鼠模型

PBMC人源化;HSC人源化

疾病模型

肺癌、结直肠癌、乳腺癌、黑色素瘤等

CDX/PDX/同源肿瘤小鼠模型

皮下接种、腹腔接种、尾静脉注射、原位接种

 

服务优势

体外评价模型

多种肿瘤模型

HIS模型

  • 抗原表达稳定,且经多次传代后不会丢失
  • CAR分子高表达效率
  • 荧光素酶标记现货细胞,体外杀伤验证、体内实时监控
  • 多种验证方式,模型充分鉴定
  • 多种肿瘤细胞的成瘤经验,覆盖实体瘤和血液瘤
  • 小鼠状态稳定,实验重复性高,结果数据可靠
  • 高标准的动物实验操作与饲养环境

 

  • 可提供PBMC和HSC不同重建方式,人源化程度高
  • 小鼠存活率高,实验窗口期长
  • 模型均一性好,数据更具说服力

 

服务案例

    • CD19过表达细胞株构建

通过慢病毒感染构建CD19稳定表达的293T细胞株,并采用流式检测其抗原CD19的表达。

图1 流式检测CD19-293T稳转细胞株CD19抗原高表达

 

    • CAR-T细胞表型分析
对活化扩增后的PBMC进行检测,结果显示成功获得高纯度的T细胞,其占比高达90%以上,T细胞的亚型分析结果显示CD4+和CD8+细胞占比分别为:37.24%和54.41%。

图2 PBMC活化扩增第十天T细胞占比及表型分析实验结果

 

    • FMC63 CAR-T细胞构建
通过慢病毒转导构建FMC63 CAR-T细胞,并使用FMC63 scFv抗体对FMC63 CAR-T细胞进行标记,FMC63 CAR的阳性率为16.99%,表明成功构建了FMC63 CAR-T细胞。

图3 FMC63 CAR阳性率检测

    • C-NKG重度免疫缺陷小鼠

缺乏成熟的T、B、NK免疫细胞,补体活性降低,巨噬细胞对人源细胞吞噬作用弱、树突状细胞功能下降,可高效地移植CDX和PDX,移植人PBMC或HSC进行人免疫系统重建,是目前公认的免疫缺陷程度高的优秀模型,可用于肿瘤、自身免疫性疾病、GvHD/移植等研究。

图4 C-NKG小鼠外周血(上)、淋巴组织(下)中的B、T、NK细胞表型检测,结果表明C-NKG小鼠缺乏成熟的T、B和NK细胞

 

    • CDX模型构建

对C-NKG小鼠和N*G小鼠进行人急性淋巴细胞白血病建模:向小鼠接种200μL PBS(对照组)、 5×105 Luci-Nalm6细胞、1×106 Luci-Nalm6细胞,右图为在第21天检测的活体成像图以及平均荧光强度图,可见人急性淋巴细胞白血病建模成功,C-NKG小鼠体内肿瘤的生长速度相较N*G小鼠更快。

          

       图5 肿瘤细胞接种第21天的小动物活体成像                          图6 肿瘤细胞接种第21天的生物发光强度

 

 

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