赛业生物依据多年病毒包装平台的经验,可以提供不同质量标准的AAV、LV、ADV等病毒,广泛运用到各种细胞系模型的构建和活体动物的体内研究中。针对AAV病毒包装,采用三质粒共转染的方法和先进的纯化工艺,可提供高纯度、高滴度、多种血清型的AAV包装定制化服务,客户多篇文献引用发表,满足基因治疗研究者的个性化选择。
服务项目
AAV病毒包装服务优势
AAV包装技术路线
病毒交付标准
AAV质量检测
赛业生物致力于提供高滴度、高质量的AAV。在质检方面,除了常规qPCR检测AAV滴度以外,还通过其他的质检方式确保AAV的质量,包括有病毒衣壳蛋白纯度检测、病毒基因组大小及纯度检测和病毒生物学活性检测等质检方法。
除了滴度检测外,还通过SDS-PAGE 考染检测方法,检测AAV衣壳蛋白的纯度。优质AAV的衣壳VP1、VP2、VP3的浓度比约为1:1:10。通过这项检测,说明AAV的衣壳蛋白纯度高,应具备良好的感染活性。
提取AAV病毒基因组,经琼脂糖凝胶电泳检测基因组大小和纯度,判别插入目的片段的大小和有无杂质,确保AAV的质量。通过这个检测,说明包装的AAV插入片段大小无误,且无杂质。
我们将不同血清型AAV以MOI=1E5感染293T细胞,48h后均能观察到较强的荧光信号,其中AAVDJ和AAV2最强。
将AAV2以不同的MOI(MOI=1E5、1E4、1E3、1E2)感染293T细胞48小时后进行流式检测,均有GFP信号。MOI=1E4时,阳性率高达99.62%;MOI=1E2时,阳性率仍有38.91%。
AAV2-GFP感染293T细胞48h
将AAV2-CMV-Luc、AAV8-CMV-Luc和AAV9-CMV-Luc分别通过尾静脉注射的方式感染小鼠,14天后经过活体检测Luc的荧光强度,3种AAV的Luc的荧光强度较高,说明具有高效的感染能力。