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转染效率低?单克隆形成率低?目的蛋白敲除不彻底?找赛业就对了!赛业生物专注于细胞领域15年,基于人工智能的AlphaKnockout基因编辑专家系统和CRISPR/Cas9技术,全新升级了细胞基因编辑系统Smart-CRISPR™,该技术比普通CRISPR/Cas9技术的基因切割效率更高,可轻松实现细胞移码突变、片段敲除、多基因敲除等多种敲除策略,更好地解决蛋白阳性残留等问题,基因编辑效率显著提升,助力您发文更快速!欢迎拨打400-680-8038点击侧边栏在线咨询或邮件至info@cyagen.com咨询订购。

活动时间:2021年3月15日——2021年4月30日

活动内容:活动期间,前100名下单客户赠送赛业15周年大礼包。

细胞敲除策略

赛业生物可根据客户需求,以及对靶基因信息和细胞的分析,选择不同的基因敲除策略,如移码突变、小片段敲除和大片段敲除等。

细胞敲除服务流程
服务优势
1. 独创Smart-CRISPR™技术:
可轻松实现移码突变、片段敲除、多基因敲除等多种敲除策略,基因编辑效率显著提升,确保项目周期8-12周内完成。
2. 规模庞大、品种齐全的科研细胞库:
赛业生物建设有各项参数明确、性能稳定的科研细胞库,包括大量标准细胞系、干细胞和原代细胞,极大规避了基因编辑影响细胞生长甚至致死等风险。
3. 专业的项目管理:
24h内出敲除实验方案,定期反馈项目进展,多名博士在内的技术团队提供支持,详尽的交付报告,并可根据客户要求提供不同克隆(纯合子、杂合子+阴性克隆)细胞的交付。
4. 成熟的基因编辑平台:
超千例项目成功案例,超200种细胞株成功构建经验,多篇相关文献引用发表,可提供从细胞基因表达调控、细胞功能验证、小鼠移植瘤模型建立及瘤组织分析的全套服务。
5. Antibiotic-Free培养工艺:
赛业运行一套基于多年细胞培养经验总结、设计的Antibiotic-Free培养工艺,遵从严格的环境、物料、人员管理机制,做到全流程无抗生素添加。在这套工艺流程下产出交付的成果,可保证100%无污染。
成功基因敲除细胞类型精选
分类 细胞名称 缩写
血液和淋巴系统 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 RAW 264.7
人B淋巴母细胞 HMy2.CIR
人T淋巴细胞白血病细胞 HuT 78
人单核细胞白血病 THP-1
人慢性髓系白血病细胞 K-562
人原髓细胞白血病细胞 HL-60
人白血病T淋巴细胞 Jurkat, Clone E6-1
骨骼、皮肤系统 小鼠黑色素瘤细胞 B16
小鼠皮肤黑色素瘤细胞 B16-F10
人骨肉瘤细胞 U-2 OS
人恶性黑色素瘤细胞 A375
人纤维肉瘤细胞 HT-1080
消化系统 小鼠结肠癌细胞 CT26.WT
人回盲肠癌细胞 HCT-8
人结肠癌细胞 HCT 116
HT-29
人结肠腺癌细胞 SW480
人结直肠癌细胞 LoVo
人食管鳞癌细胞 KYSE-150
人胃癌细胞 HGC-27
呼吸系统 小鼠肺癌细胞 LLC
仓鼠肺细胞 V79
人正常肺上皮细胞 BEAS-2B
人大细胞肺癌细胞 NCI-H460
人非小细胞肺癌细胞 NCI-H1299
A549
人肺鳞癌细胞 SK-MES-1
NCI-H520
泌尿系统 小鼠肾小球系膜细胞 SV40 MES 13
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 PC-12
大鼠肾细胞 NRK
非洲绿猴肾细胞 Vero
恒河猴肾细胞 LLC-MK2
人膀胱癌细胞 5637
人前列腺癌细胞 PC-3
人胚肾细胞 293 Cells, low passage
人肾细胞腺癌细胞 786-O
ACHN
脑和神经系统 小鼠垂体瘤细胞 AtT-20
大鼠胶质瘤细胞 C6
人胶质瘤细胞 U251
人神经母细胞瘤细胞 SK-N-SH
内分泌系统 小鼠乳腺癌细胞 4T1
人乳腺癌细胞 MCF-7
MDA-MB-231
生殖系统 仓鼠卵巢细胞亚株 CHO-K1
人宫颈癌细胞 Hela
人卵巢癌细胞 SK-OV-3
循环系统 小鼠成肌细胞 C2C12
大鼠成肌细胞 L6
大鼠心肌细胞 H9c2(2-1)
细胞敲除成功案例

项目名称:人HCT116细胞PSME3基因敲除

1、gRNA设计:

gRNA位点1:ATACGCTACCTAACATGGCTGGG;

gRNA位点2:CCAGCATGCAAAATACAATGGGG

 

2、引物合成及质粒构建:

 

3、细胞转染

首先确定最佳的电转参数,进而通过电转的方式将载体转染进细胞。

 

4、筛选单克隆细胞并培养

 

5、PCR及电泳鉴定:

鉴定策略的原理如下:

 

6、测序鉴定:

ATAAACAGAGGATTTAAGACTTTTGTTATGTTTTAGACGC-del;

1809bp--AGTGGCTAATGCCT GTAATCC CACCACTTTGGGAGGCCAA

 

7、克隆状态:

细胞检测结果:无菌、无支原体

培养体系:McCoy‘s 5A+ 10% FBS + 500μg/mL Hygromycin;1:3传代

客户引用文献4750篇,IF合计20854,被引用25043次
CD73 on cancer-associated fibroblasts enhanced by the A2B-mediated feedforward circuit enforces an immune checkpoint.
Nature Communications (2020)
Maternal paraben exposure triggers childhood overweight development.
Nature Communications (2020)
Selective deletion of endothelial cell calpain in mice reduces diabetic cardiomyopathy by improving angiogenesis.
Diabetologia. (2020)
TREM2 promotes Aβ phagocytosis by upregulating C/EBPα-dependent CD36 expression in microglia.
Scientific Reports. (2020)