心心念念的暑假来了,可是我的实验还看不到希望,为什么慢病毒(LV)包装出毒量很低?感染细胞效率低?感染细胞后还生长状态差?隔壁课题组的小伙伴,做腺相关病毒(AAV)包装死活包不出来,体内感染还荧光弱......科研人的美好假期和论文实验该如何同时拥有?不纠结,赛业帮你两个愿望都实现!选好病毒服务,大大加速实验进程,不辜负夏日的浪漫与美好。

赛业生物可提供慢病毒(LV)、腺相关病毒(AAV)、腺病毒(ADV)包装服务,从病毒滴度、纯度、活性各方面确保病毒包装质量的可靠性,广泛应用到各种细胞模型的构建、活体动物的体内注射、基因治疗研究等领域,且被多篇文献引用报道,助推实验顺利开展。夏日心动不止畅饮橘子汽水后的再来一瓶,还有赛业生物送你的燃情夏日礼,现慢病毒包装、腺相关病毒包装服务拼单热力来袭,拼一拼太划算,最高劲省5400元!拼它!如需咨询订购,欢迎拨打400-680-8038 或点击 侧边栏在线咨询或邮件至info@cyagen.com

● 活动时间:2021年7月9日——2021年8月31日

● 活动对象:科研终端客户

● 活动内容:活动期内,慢病毒和腺相关病毒包装服务任意搭配订购,享受以下拼单优惠价。以下规格仅供参考,更多规格请联系咨询。

病毒包装类型 规格 原价(元) 拼单促销单价(元)
1个项目 ≥3个项目 ≥5个项目
LV 过表达慢病毒 ≥108 TU 6200 5500 4800 4200
干扰慢病毒(3+1) ≥108 TU 8800 7400 6600 6400
基因敲除慢病毒(含Cas9) ≥108 TU 13200 10600 9600 9200
AAV* 过表达腺相关病毒 ≥1012 GC 9600 8200 7200 6800
干扰腺相关病毒(3+1) ≥1012 GC 20800 17200 16200 15400
基因敲除腺相关病毒 ≥1012 GC 9800 8800 7800 7200

*我们可提供高纯度、高滴度、多种不同血清型的AAV(部分列举)

血清型 组织亲和性 血清型 组织亲和性
AAV1 肌肉,心脏,神经组织,骨骼肌 AAV7 肌肉,肝脏
AAV2 肌肉,肝脏,脑组织,眼,神经 AAV8 肌肉,肝脏,神经组织,眼
AAV5 肺部,眼,神经组织,胰腺 AAV9 心脏,肌肉,肺部,肝脏,神经
AAV6 肺部,心脏 ……
服务流程
服务流程
服务优势
  • 种类丰富的载体库和基因库,可操作编码基因和各种非编码基因,解决客户定制化需求;
  • 成熟稳定的病毒包装平台,客户多篇引用文献发表;
  • 可提供包病毒后的体外和体内研究的整体服务,病毒包装(LV/AAV)→细胞/动物模型构建→表型分析/组织分析→机制探讨;
  • 详尽的交付:高活性病毒、专业的实验报告、严格的质检报告、详尽的操作手册,专业省心。
案例展示

慢病毒感染效果

  • HepG2

    HepG2

  • A549

    A549

  • HT1080

    HT1080

  • THP-1

    THP-1

  • Ploy

    Ploy

  • 人脐带间充质干细胞

    人脐带间充质干细胞

更多LV、AAV感染效果请联系我们咨询。

关于LV、AAV,这可能是你最关心的问题
  • 为何我的LV包装出毒量很低?

    为什么都是采用同样的慢病毒包装系统,别人次次成功,我的不是滴度低就是稳定性差?这是因为除了包装系统本身,LV的包装还与下列几个因素密切相关:

    (1)细胞状态:LV的包装一般使用293T细胞,293T细胞的活力、生长状态,是否处于对数生长期、铺板是否均匀等对病毒的产量影响很大,并控制转染前密度为50~60%。

    (2)目的基因:目的基因的大小、序列及翻译的蛋白是否含有毒性均会影响包装效果;例如,若目的片段较大(>2.5k),则可能会导致包装滴度下降,甚至无法包装。某些过表达会产生细胞毒性的蛋白,可能会导致细胞异常从而出毒量低(可考虑更换为腺病毒)。

    (3)质粒质量:做好阴性对照(GFP组),确保包装目的基因的载体构建的完整性,并做好纯化。

    (4)收毒时机:转染后24、48h观察细胞生长状态及荧光状态,生长状态良好一般于48h第一次收集病毒上清,换液后于72h再次收集病毒上清。

  • 包装出来的LV感染细胞效率低?

    理论上LV感染细胞的能力很强,而且能感染分裂和非分裂期的细胞,但为什么我的感染效果总是不理想?影响LV感染效果的因素有哪些?

    (1)细胞类型:有些细胞本身就较难被感染,如某些原代细胞,可考虑加大病毒量或采用浓缩病毒进行感染。

    (2)细胞生长状态:感染细胞前,需要保证细胞处于良好的生长状态,以及合适的生长密度,细胞膜的流动性、与细胞表面的接触面积及表面受体的表达丰富等均会影响病毒感染细胞的效果;另外对于悬浮细胞,可以采用离心感染的方法。

    (3)病毒质量:包装出来的LV应尽量避免冻融,反复冻融会降低病毒的滴度(每次约降低10%),若一次用不完建议分装后储存于-80℃,但即使-80℃也不建议超过6个月;对于4℃保存的LV则尽量3天内用完。

    另外,也可考虑加入Polybrene助感染试剂增强感染效果,但Polybrene本身具有细胞毒性,谨慎使用。

  • AAV, ADV or LV,三种工具病毒有什么不同?
    项目 ADV LV AAV
    颗粒直径 90-100nm 80-100nm 20-30nm
    基因组 36kb双链DNA 9.3kb双链RNA 4.7kb单链DNA
    载体容量 8.3kb ≤6kb ≤4.5kb
    表达量 高水平瞬时表达 中等水平稳定表达 中高水平阶段性表达
    表达时效性 1-2天开始表达,持续≤(2-4)周 2-4天开始表达,持续≥6个月 7-14天开始表达,持续≈3~6个月
    体内扩散能力 一般
    免疫原性 中低 极低
    整合方式 不整合 高频随机整合 少量定向整合
    特点 产量高,易纯化 产量较低,稳定表达 产量高,组成简单,安全性好
    适用 细胞/动物较大基因过表达 细胞实验首选 动物实验首选
  • AAV血清型那么多,该怎么选?
    组织部位 血清型(按推荐程度) 注射方式(小鼠) 检测时间(参考)
    视网膜 AAV(2/5/8) 视网膜下注射/玻璃体腔注射 4周
    AAV(2/9/1) 肾盂注射 12周
    AAV(6/5/9) 气管内注射 4周
    AAV(8/2/6) 静脉注射 1/2/4/13/17周
    脑组织 AAV(2/5/9) 脑立体定位注射 4周
    心脏 AAV(9/1/6) 尾静脉注射/原位多点注射 4周
    骨骼肌(肌肉) AAV(9/1/2) 原位注射 4周
    脂肪 AAV(9/8) 皮下脂肪原位注射 2周
    中枢神经/外周神经 AAV-PHP.eB
    AAV-PHP.S
    尾静脉注射 3周
客户精选文献
Ubiquitinated-PCNA protects replication forks from DNA2-mediated degradation by regulating Okazaki fragment maturation and chromatin assembly.
Nat Commun. (2020)11, 2147
Integrated Transcriptome and Network Analysis Reveals Spatiotemporal Dynamics of Calvarial Suturogenesis.
Cell Rep. (2020)jul 7;32(1):107871
Obesity induced MBD2_v2 expression promotes tumor‐initiating triple‐negative breast cancer stem cells.
Mol Oncol. (2019);13(4):894
Oncofetal HLF transactivates c-Jun to promote hepatocellular carcinoma development and sorafenib resistance.
Gut. (2019)pii: gutjnl-2018-317440
Histone serotonylation is a permissive modification that enhances TFIID binding to H3K4me3.
Nature. (2019)DOI: 10.1038/s41586-019-1024-7