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基因敲除(KO)可有效实现目的基因功能缺失的作用,是基因功能研究和药物发现的强大工具。但因为细胞种类繁多,不同细胞的基因编辑实验条件存在较大差异,基因敲除细胞株的构建实验个性化很强。

赛业生物基于多年成熟稳定的模式动物和体外细胞中的CRISPR,以及丰富的(干)细胞培养技术经验,可轻松搞定IPSC和其他各种细胞系的基因敲除(KO),敲入(KI)和点突变(PM)。春季订购细胞株,享最低6.7折优惠,低至1.66万元!欢迎拨打400-680-8038或点击侧边栏在线咨询或邮件至info@cyagen.com 咨询订购!

活动时间:2022年2月17日——2022年4月30日

活动对象:全国科研终端客户

活动内容:订购以下基因敲除、基因敲入及点突变细胞株享最低6.7折优惠,低至1.66万元!

细胞类型 交付标准 原价(万元) 活动价(万元)
特价KO细胞株 单克隆纯合子 2.48 1.66
成功案例KO细胞株 单克隆纯合子 2.48 1.98
IPS-KO细胞株 单克隆纯合子(含干性检测) 7.00 4.90
IPS-点突变细胞株 单克隆纯合子(含干性检测) 8.00 5.60
IPS-KI细胞株 阳性克隆(含干性检测) 9.00 6.30
特价细胞:HEK-293,A549,HCT116,RAW 264.7,MFC,4T1,C2C12,STC-1,HGC-27,TM3。超200种成功基因编辑细胞类型,详情请拨打400-680-8038或邮件至info@cyagen.com咨询。
[ 服务流程(快至8周)]
[ 服务优势 ]
成熟的技术平台
从体内动物实验到体外细胞实验,上万例成功基因编辑项目积累。
智能的方案系统
独创的Smart-CRISPR™细胞基因编辑系统,让基因敲除方案更快更智能。
品种齐全的细胞库
各类验证数据明确的科研细胞库,确保细胞良好培养状态且无污染。
专业的IPS细胞培养体系
确保IPS细胞在基因编辑过程中保持干性不分化。
[ 智能KO方案设计系统马上体验 ]

Smart-CRISPR细胞基因编辑系统

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Human
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[ 成功案例精选 ]
案例一
案例二

通过CRISPR/Cas9技术构建Human TNFAIP8L2基因敲除的IPS细胞模型

简介:通过CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除诱导性多能干细胞IPS的Human TNFAIP8L2基因,电转后挑单克隆,并通过PCR、测序和干性检测,成功获得Human TNFAIP8L2基因敲除的纯合细胞。

敲除策略
阳性克隆基因型鉴定

测序后经分析比对,确定克隆为敲除纯合细胞株。
A1:CATAGATGAGACAAGCAGTGAGGTGCTAGATGAGCTCTAC--del
  305bp--CGTGTTTGATCACTTCTCTGACCCAGGTCTGCTCACGGCC

A2:CTGTGGCTCATCTCTTCATAGATGAGACAAGCAGTGAGGT--del
  335bp--TCTCTGACCCAGGTCTGCTCACGGCCCTCTATGGGCCTGA

阳性克隆干性检测

利用免疫荧光技术检测1E3-IPS细胞的三个干性标记基因,分别为NANOG、OCT4和SOX2,均能检测到阳性表达信号,表明1E3-IPS细胞具有干性。

通过CRISPR/Cas9技术构建Human CARM1基因敲除的PANC-1细胞模型

简介:通过CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除人细胞PANC-1的CARM1基因,电转后挑单克隆,并通过PCR、测序和Western Blot验证,获得Human CARM1基因敲除的纯合细胞。

敲除策略

移码突变

片段敲除

阳性克隆基因型鉴定

移码突变
WT:ATGATGAAGGACTGCTTGCCCACACGGGCTGCACTCTGTCTCTCGGGACACTGA
KO:ATGATGAAGGACTGCTTGCCCACAC--GCTGCACTCTGTCTCTCGGGACACTGA

片段敲除
KO:CCCTCTTTCTTGTCTCCTGCACTCTGGAATAGCTCCCACC--del
5786bp--ACAGACATCAGCGTATATTTTACAATTATTTTATTGAGCT

阳性克隆干性检测
[ 干货下载 ]

日常在进行基因编辑过程中,构建基因敲除细胞系有哪些策略?如何选择才是最优解?如何鉴定基因编辑细胞系?如果您还在纠结这些棘手问题该怎么解决,那么强烈安利您入手下面这本必备工具书!

工具书精彩内容节选
如何避免脱靶效应?
如何选择最有效的细胞转染法?
KO细胞是否可以一定确保蛋白不表达?
移码突变和片段敲除哪个能更好的破坏目的蛋白的功能结构域?
为什么点突变/KI细胞的阳性克隆的获得率低?
KI细胞如何设计donor?
基因编辑细胞系常见问题解答