人RHO基因编码的视紫红蛋白对于光信号传导至关重要,该基因突变已确认与视网膜色素变性(RP)和先天性静止性夜盲症(CSNB)等眼科疾病相关。目前靶向RHO的基因疗法有ASO、CRISPR等,HUGO-GT™全人源化动物模型的应用将有助于推动RHO相关潜在疗法向临床试验进一步转化。
赛业生物利用胚胎干细胞(ES)基因编辑打靶技术,将C57BL/6J小鼠的Rho基因ATG启动子至下游500bp片段替换为人源RHO基因ATG启动子至下游500bp片段,以构建B6-hRHO小鼠;并在此基础上构建热门点突变小鼠B6-hRHO(P23H)。
结果表明,人源基因编码的RHO蛋白在B6-hRHO小鼠体内正常表达,其视网膜形态、功能与野生型小鼠相同,不存在视觉缺陷;而B6-hRHO(P23H)点突变小鼠则出现了视网膜色素变性表型。这说明B6-hRHO和B6-hRHO(P23H)小鼠构建成功,可用于视网膜色素变性的致病机理及相关新药研发。