相较于传统动物模型,人源化小鼠由于在模拟人类生理和病理特征方面表现出更强的相关性,逐步成为疾病研究工具的首选。
当前,许多科学研究普遍使用的还是部分基因人源化小鼠,比如Tg转基因小鼠、CDS人源化或者单个外显子人源化小鼠。
但在探讨遗传疾病致病机理或药物研发方面,Tg或其他部分人源化小鼠存在明显不足,如Tg的随机插入及建系复杂性和人源化区域不足性等。
如果要更深入地研究致病机理,就需要用上长片段甚至全基因组人源化小鼠。但是,要实现全基因组替换所需的技术难度高,大规模引入的外源序列可能会影响原本基因的表达调控,让问题更加棘手。
为此,赛业生物启动了HUGO-GT®计划,基于自主研发的TurboKnockout技术,对鼠源基因实现原位替换,成功构建了涵盖更丰富干预靶点的全基因组人源化小鼠。
HUGO-GT®小鼠搭载了更高效的大片段载体融合技术,可以作为万能模板进行针对性的突变定制服务,是更贴近真实世界生物机制的药物临床前研究模型。
同时,在HUGO-GT®小鼠的基础上,我们还可以为研究人员提供眼科、神经、肿瘤免疫等疾病研究领域的CRO服务,全面赋能遗传性疾病研究以及基因治疗药物开发。
模型开发及技术商业化
全基因组人源化模型授权
新型药物开发
其他灵活合作方式
完整的基因组序列(UTR、外显子、内含子)确保在小鼠基因组背景和体内环境中准确模拟人类基因功能。
保持了天然的基因调控和表达模式,使不同组织和细胞类型中的各种异构体得以保留。
从野生型小鼠的胚胎干细胞开始进行人源化操作,能够快速引入致病突变,极大促进了药物测试和科学研究的进程。
减少其他模型中常见的实验误差,使得观察到的表型特征更接近于真实的人类疾病状况。
相较于那些仅包含点突变、仅替换编码序列(CDS)或随机整合的BAC转基因模型,该方法具有显著的优势。
人RHO基因编码的视紫红蛋白对于光信号传导至关重要,该基因突变已确认与视网膜色素变性(RP)和先天性静止性夜盲症(CSNB)等眼科疾病相关。目前靶向RHO的基因疗法有ASO等,HUGO-GT®全人源化动物模型的应用将有助于推动RHO相关潜在疗法向临床试验进一步转化。
赛业生物利用胚胎干细胞(ES)基因编辑打靶技术,将C57BL/6J小鼠的Rho基因ATG启动子至下游500bp片段替换为人源RHO基因ATG启动子至下游500bp片段,以构建B6-hRHO小鼠;并在此基础上构建热门点突变小鼠B6-hRHO(P23H)。
结果表明,人源基因编码的RHO蛋白在B6-hRHO小鼠体内正常表达,其视网膜形态、功能与野生型小鼠相同,不存在视觉缺陷;而B6-hRHO(P23H)点突变小鼠则出现了视网膜色素变性表型。这说明B6-hRHO和B6-hRHO(P23H)小鼠构建成功,可用于视网膜色素变性的致病机理及相关新药研发。