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无菌小鼠及肠道微生物移植小鼠模型是研究肠道微生物-宿主间相互作用非常重要且有效的实验工具。在基因修饰小鼠的基础上，构建相应无菌化小鼠可实现对特定基因与肠道微生物相互作用机制进行研究。而且，通过移植人肠道微生物建立的人源化小鼠模型可以再现独特人肠道微生物组成。这类小鼠模型的建立为阐明肠道微生物在人相关疾病形成过程中的因果/影响作用提供了强有力的工具。

那么什么是无菌小鼠？培养无菌小鼠需要哪些条件？无菌小鼠有哪些应用呢？赛业生物无菌鼠服务业务主管张征针对这些问题进行了主题为“无菌小鼠养成记”的线上课程，快长按下方二维码免费听课吧！

为什么要研究人肠道微生物组？什么是无菌小鼠及其特征？如何构建肠道微生物小鼠模型？肠道微生物人源化小鼠在代谢、肿瘤、神经和肝脏等相关疾病研究中的如何应用？赛业生物高级科学家俞晓峰博士围绕以上问题进行了主题为“无菌小鼠在肠道微生物组学研究中的应用”的线上课程。如果您对无菌鼠及肠道微生物相关内容感兴趣，快长按下方二维码免费听课吧！

针对无菌鼠课程答疑环节大家提出的问题，我们进行了收集整理，下文为赛业生物无菌鼠服务业务主管张征针对答疑环节提出的代表性问题给出的详细解答。

一、关于无菌孕鼠的喂养

无菌孕鼠饲养于无菌隔离器内，属于无菌级实验动物。饲养无菌孕鼠的所有操作需严格按照隔离包物品进出流程，保证隔离包内环境始终处于无菌状态。此外，我们还需要从以下几个方面关注无菌孕鼠的日常照料问题：

1. 关注孕鼠的健康情况：大周龄的繁殖对需及时淘汰，孕鼠周龄太大，可能会发生难产现象；

2. 确保营养充足：母鼠在妊娠期或哺乳期对于蛋白质、维生素、脂肪等营养物质需求比较高，可以添加瓜子以求母鼠有足够的营养哺育下一代；

3. 分娩和生产后避免打扰：母鼠在分娩过程中或哺乳期受较大噪音、惊吓等刺激以及频频观察有可能导致母鼠吃仔；另外，补充食物和水时动作需轻柔，因为此时的母鼠既虚弱又神经质；

4. 尽量避免混入陌生气味：尽量产后一周内不换笼；换笼后可以从旧笼盒中取少量垫料和粪便放入新笼盒中，减少新环境引起母鼠吃仔或不带仔。

二、赛业无菌小鼠动物健康监测体系

无菌小鼠是指无可检出的一切生命体的实验动物，这里的“无”是相对的，指用现有的检测技术在动物体内外的任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫。《GB 14922.2-2011 实验动物 微生物学等级及监测》文件中规定无菌动物检测频率为“每年检测动物一次。每2至4周检查一次动物的生活环境标本和粪便标本”。赛业无菌小鼠动物健康监测基于国标和Taconic的无菌动物健康监测要求，建立了一套完善的健康监测体系。赛业无菌小鼠健康监测分为周检、月检和季度检。

周检：每个隔离器每周都要进行无菌检测，样品来自小鼠接触过的饲料、饮用瓶中的水、垫料、粪便、皮毛和隔离包环境混合物。

月检：每月采集小鼠粪便送检16S bacterial ribosomal RNA 。

季度检：每季度对Taconic IHMS™健康监测体系 （International Health Monitoring System™）列出的已定义的病毒、病原菌和寄生虫进行检测。隔离器环境微生物监测的目的是及时发现无菌隔离器可能出现的污染。

具体检测列表，见下图。

三、抗生素处理菌群消除小鼠 VS 无菌小鼠

用大量广谱抗菌素对小鼠肠道微生物进行处理，会造成对抗生素敏感的微生物缺失，即便使普通动物暂时无菌，但这种动物也不是无菌动物。因为这种无菌状态往往是一过性的，某些残存的细菌在适当的条件下又会在体内增殖；即使能把体内细菌全部杀死，它们给动物造成的影响却是无法消除的。因此，无菌小鼠必须是生来就无菌的小鼠。

四、无菌小鼠的应用

1. 与正常动物比较，不同带菌状态下生理功能或疾病反应性的差异；

2. 与基因编辑小鼠结合，研究菌群与特定基因的互相作用机制；这种研究可以排除微生物背景干扰前提下研究基因作用

3. 菌群移植：涉及肠道微生物与人相关疾病研究领域：如验证特殊微生物保护或促进人相关疾病作用；揭示病人微生物在引起疾病发生病理变化过程中的机制等；发现针对微生物的靶向药物，阐明微生物调节药物应答机制等。

五、无菌小鼠能通过饮食诱导肥胖吗？

无菌小鼠因缺失肠道菌群，比正常小鼠更瘦，且表现出对饮食诱导的肥胖并不敏感，提示肠道菌群与肥胖及代谢疾病因果关联。最新研究发现，在喂食西式饮食后，无菌小鼠与正常小鼠均出现了空腹血糖升高、糖耐量受损、肝脏重量增加、肝脏甘油三酯水平升高、肝脏脂肪变性及脂肪组织炎症的症状。来源：《Germ‐Free mice are not protected against diet‐induced obesity and metabolic dysfunction》

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