THP-1细胞系在免疫与炎症研究中的应用

一、THP-1细胞的应用——作为研究炎症和免疫方向的细胞模型

单核/巨噬细胞属于固有免疫系统，它们可识别、吞噬和消化侵入机体的病原体或其他异物。同时，它们作为一类主要的抗原提呈细胞，在特异性免疫应答的诱导和调节起关键作用。在特定的诱导条件下，THP-1细胞可分化成单核/巨噬细胞，因此THP-1细胞可作为研究炎症和免疫方向的细胞模型。

先通过佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯（phorbol-12-myristate-13-acetate（PMA）可以将THP-1细胞诱导成巨噬细胞，再添加脂多糖（LPS）和IFN-γ诱导成M1型巨噬细胞，或添加IL-4、IL-13等因子诱导为M2型巨噬细胞。M1型巨噬细胞富含溶酶体颗粒，可通过反应性中间物（ROI）、一氧化氮（NO）和释放溶酶体酶杀伤清楚病原体，并合成分泌MCP-1、CCL3、CXCL8等趋化因子和IL-1β、IL-6、TNF-α等促炎因子介导产生炎症反应。所以THP-1细胞来源的M1型巨噬细胞是一种典型的炎症模型。而M2型巨噬细胞可合成分泌IL-10、TGF-β等因子，介导产生抑炎作用和参与损伤组织修复和纤维化。

二、THP-1细胞系的优点

单核/巨噬细胞的来源并不唯一，除了可以通过THP-1细胞系的诱导分化，还能从外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell, PBMC）分离得到。虽然两种方法均能获得单核/巨噬细胞，但较多研究使用THP-1细胞系，这是由于THP-1细胞系具有下面的优点：

三、创建带有基因修饰的THP-1细胞模型，助力免疫和炎症等领域的研究

基于THP-1细胞的众多优点，不少科研人员以THP-1细胞为遗传背景进行基因修饰，再分化巨噬细胞，开展免疫和炎症等领域的研究。比如下面的报道^[2]，作者通过CRISPR-Cas系统在THP-1细胞中敲除CXCR4，再分化为肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages，TAMs），从而研究在TAMs中敲除CXCR4对乳腺癌细胞迁移的影响。

作者将THP-1来源的CXCR4-KO巨噬细胞与MCF7乳腺癌细胞共培养，通过RT-qPCR证实了在MCF7乳腺癌细胞中MAPK和PI3K水平的显著降低，显示了CXCR4对致癌性MAPK信号通路有重要影响（图1）。

图1 MCF7乳腺癌细胞中MAPK和PI3K的表达水平^[2]

接着检测MCF7细胞的迁移能力，发现在THP-1来源的巨噬细胞中敲除CXCR4可降低MCF7乳腺癌细胞的迁移能力（图2）。

图2 MCF7细胞的伤口愈合迁移测定^[2]

赛业生物Smart-CRISPR™基因编辑系统

赛业生物扎根细胞领域十几年，拥有超千例项目成功案例，包括基因的敲除、敲入和点突变，多篇相关文献引用发表，平台成熟稳定。更有重磅开发的Smart-CRISPR™细胞基因编辑系统，通过深度的基因信息分析、优秀的gRNA设计，以及表型预测、脱靶分析等多个方面综合考量，可提供高效率、高成功率的基因编辑方案，为您定制基因编辑THP-1细胞系及其他单核细胞系。

另外，赛业生物细胞技术服务平台还可提供各类型的载体构建，慢病毒、腺病毒和腺相关病毒的包装，以及基因过表达、干扰稳转株的构建服务，成功保障，安全无忧，欢迎咨询。

《基因编辑细胞系常见问题解答》

现在扫码更可免费申领