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《鼠年说鼠》第十一期:如何选择PCR反应体系?

《鼠年说鼠》系列文章,每周二更新,专门解答大小鼠铲屎官们在养鼠过程中经常遇到的繁育与鉴定类的问题,同时向大家征集问题,任何基因编辑鼠饲养繁殖或鉴定的困惑统统可以丢给小赛,小赛会给您回复或统一在后面的内容为大家做出详细的解答。

 

基因工程小鼠基因型PCR鉴定的基本原则是利用基因工程小鼠基因组与野生型小鼠基因组的序列差异,以小鼠基因组DNA为模板进行PCR,并以凝胶电泳比对比不同基因型特异产物的大小,根据条带大小来区分小鼠的不同基因型。今天我们就开始第十一期的内容吧——如何选择PCR反应体系~

 

《鼠年说鼠》第十一期:如何选择PCR反应体系?

 

2条引物扩增小于1kb的片段体系

 

2条引物扩增小于1kb的片段体系

备注:如果需要3条引物,则以1:1:1的比例,ddH2O减少,总体积不变。

 

4条引物扩增小于1kb的片段体系

 

4条引物扩增小于1kb的片段体系

 

LongAmp聚合酶的体系

 

LongAmp聚合酶的体系

 

短片段PCR 程序

 

短片段PCR 程序

备注:根据条带大小来确定延伸时间(诺唯赞P112-01是60s/kb,P222是20s/kb)

 

LongAmp聚合酶的PCR程序

 

LongAmp聚合酶的PCR程序

 

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下期内容预告

PCR胶浓度、电泳电压及时间的选择

 

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赛业生物历经14年发展,已服务全球数万名科学家,产品和技术已直接应用于包括CNS(Cell,Nature, Science)三大期刊在内的3600余篇学术论文。除了提供基因敲除基因敲入条件性基因敲除模型定制服务外,赛业生物还有专业的手术疾病模型团队,可以提供多种复杂精细的小动物手术疾病模型;药物筛选评价小鼠平台可以提供从欧美行业领袖引进的免疫缺陷鼠、用于心血管及阿尔茨海默症等研究的人源化小鼠;国际标准化无菌鼠技术平台可以提供无菌鼠、无菌动物定制服务、微生物菌群移植服务等基于无菌动物模型的各类产品和服务,结合赛业生物成熟稳定的基因编辑小鼠平台,还可帮助您研究菌群与基因的互作机制。

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