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前沿速递：又一细胞治疗产品获批临床，iPSC基因编辑功不可没！

2023年7月18日，国家药监局药品审评中心官网显示，由启函生物研制的QN-019a细胞注射液的临床试验申请已获得默示许可。QN-019a是一款靶向CD19的同种异体CAR-NK细胞，通过多位点基因编辑技术修改人源多能诱导干细胞（iPSC）并由此分化而来，这是中国首个获批的基因编辑iPSC来源的细胞治疗产品。

iPSC体外疾病模型研究思路

为什么选用iPSC基因编辑模型？

1.小鼠模型不能完全展现人类疾病的表型与发生机制，使用基因编辑iPSC细胞疾病模型更能模拟人类疾病的发生。

2.可创造遗传背景单一的细胞系，减少因遗传背景差异而导致的表型变异。

3.iPSC在体外可无限扩增和定向分化，有利于大规模的药物筛选和替代较难获得的原代细胞系。

赛业生物iPSC体外疾病模型

研究平台为您助力

诱导多能干细胞（iPSC）能再分化成特定的细胞类型、组织和器官，联合基因编辑技术使用，可用于探索疾病发生的机制、开发新型有效的药物和细胞治疗等。赛业生物iPSC体外疾病模型研究平台，拥有成熟的基因编辑技术和干细胞培养体系，攻克了iPS细胞培养难、基因编辑、单克隆化难等多方面问题，同时结合一站式表型分析服务，可为客户打造多种疾病应用场景的体外模型构建和检测服务。

01 构建iPSC体外疾病模型的技术难点与赛业生物的解决方案

难点	赛业生物解决方案
细胞培养：培养条件苛刻，编辑过程容易分化，失去干性	17年干细胞培养经验，拥有成熟的iPSC编辑和培养体系。通过赛业生物的培养体系，我们可培养出理想的iPS集落：内部紧实、大小均匀且边缘清晰
iPSC基因编辑：不同个体和组织来源的iPSC差异较大，基因操作难度高	成熟稳定的基因编辑平台，拥有上万例基因编辑项目经验，iPSC项目成功经验丰富 ▷智能的Smart-CRISPR™细胞基因编辑系统：可科学设计高效率、低脱靶的gRNA ▷自研的A-donor载体HDR系统：HDR效率高达50%，远高于市面上的编辑效率，可实现无痕修复（footprint-free） ▷合适的转染条件：通过优化转染条件，转染效率>50%，活率高达80% ▷RNP递送体系：选择RNP递送提升gRNA切割效率和转染细胞活率，降低脱靶效率，KO效率高达90%以上
单克隆形成：单克隆化制备复杂，克隆形成率较低	具备独特的单细胞筛选技术，单克隆形成率可达30%以上，通过筛选一轮即可获得足够的阳性克隆

02 iPSC体外疾病模型服务内容及交付标准

03 iPSC体外疾病模型服务案例——以iPSC-hTNFAIP8L2-KO为例

通过CRISPR/Cas基因编辑技术，在诱导性多能干细胞iPSC中敲除Human TNFAIP8L2基因。通过小片段的敲除方法，在TNFAIP8L2的2号外显子设置两条sgRNA，预计删除2号外显子300 bp。经过PCR和测序鉴定，确定获得TNFAIP8L2基因敲除的纯合IPS细胞。再通过免疫荧光染色，检测NANOG、OCT4和SOX2三个干性标记基因，均能检测出阳性信号，表明该敲除细胞具有干性。