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Cre-loxP重组系统能实现时空特异性打靶,Cre工具鼠模型推荐

超强辅助Cre鼠
 
Cre-loxP重组系统能实现时空特异性打靶

这其中少不了Cre鼠的助力

有小伙伴@没有蛋糕和汽水这样评价道:

“没有Cre鼠,flox鼠敲得再完美也没有意义。果然每一只flox鼠都在寻找它的Cre鼠。”

那么,屏幕前的你是否还缺一只合适好用的Cre鼠呢?

快来把flox鼠的这位好搭档带回家吧!

 

工具鼠模型推荐

Cre鼠常用于与flox鼠杂交进行条件性基因敲除,也有研究将其用于切割位于报告基因前的终止序列,以达到荧光标记特定细胞的目的。改造并优化Cre,结合细胞/组织特异性的调控元件,可实现时空条件性靶基因敲除/表达。

 

赛业生物药物筛选评价小鼠模型平台可为研究人员提供Cre工具鼠、诱导型Cre工具鼠、荧光标记模型等多类型工具鼠模型,助力新药研发。

 

产品类型

产品编号

产品名称

主要表达部位

Cre工具鼠

C001190

Nppa-Cre

心肌细胞

C001279

Pax6-Cre

视网膜、胰腺原始细胞等

C001352

Pdgfra-Cre

视网膜内核层等

C001353

Clec4f-iCre

Kupffer细胞

C001354

H11-Alb-iCre

肝细胞

C001355

H11-Col2a1-iCre

软骨细胞

C001357

H11-Vav1-iCre

造血干细胞

C001358

Lyz2-IRES-iCre

骨髓细胞谱系

C001359

Sftpc-iCre

II型肺泡细胞

C001366

Ctsk-iCre

破骨细胞

I001024

H11-EIIA-iCre

全身性

I001038

H11-Myh6-iCre

心肌细胞

C001382

Cyp19a1-IRES-Cre

卵巢颗粒细胞

C001389

Elf5-Cre

胎盘滋养层细胞、乳腺、子宫

C001391

Cx3cr1-iCre

脑部小胶质细胞等

诱导型Cre工具鼠

C001356

H11-CAG-MerCreMer

全身性

I001014

Sftpc-MerCreMer

II型肺泡细胞

I001021

Vil1-MerCreMer

肠绒毛、隐窝上皮细胞

I001025

Cdh16-MerCreMer

肾小管上皮细胞

荧光标记模型

I001027

RCL-ChR2_H134R/EYFP

眼部

I001028

RCL-GCaMP6f

钙结合(如神经元激活)

工具鼠

I001040

RC-LR-DTR

全身性

 

模型验证——以Cx3cr1-iCre小鼠为例

Cx3cr1-iCre小鼠与Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配,产生双基因杂合子代小鼠,Cre酶介导的重组将导致tdTomato蛋白在子代Cre阳性细胞中表达。分别采集7周龄子代小鼠的脑、皮肤、肝、肾、肠、脾和肺组织等组织,通过免疫荧光染色观察Cre重组酶的表达情况。其基因型为——实验组(Cre+):Cx3cr1-iCre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+];对照组(Cre-):Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/CKI]。

 

1.Cre重组酶脑部的表达情况

超强辅助Cre鼠

脑部组织免疫荧光染色

 

Cre+(Cx3cr1-iCre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+])小鼠在脑部组织中存在大量的tdTomato蛋白红色荧光,其表达与小胶质细胞标记物IBA1的表达的存在共定位,表明在脑部小胶质细胞中存在大量的Cre重组酶表达,而对照组(Cre-)小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达,不存在Cre重组酶的表达。

 

2.Cre重组酶在皮肤组织中的表达情况

超强辅助Cre鼠

皮肤组织免疫荧光染色

 

Cre+(Cx3cr1-iCre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+])小鼠在皮肤组织中存在大量的tdTomato蛋白红色荧光,表明在该部位存在大量的Cre重组酶表达,表达的细胞可能是巨噬细胞。而对照组(Cre-)中的红色荧光是由于Rosa26-LSL-tdTomato品系小鼠自身的泄漏造成的(内部数据显示Rosa26-LSL-tdTomato小鼠有几率在皮肤出现轻微泄漏,但在其它部位并不存在泄漏)。

 

3.Cre重组酶在肺、肾、肝和肠道的表达情况

超强辅助Cre鼠

肺、肾、肝和肠道免疫荧光染色

 

Cre+小鼠在肺部、肾脏、肝脏和肠道的部分组织中存在tdTomato蛋白红色荧光,表明在这些部位存在Cre重组酶表达,表达的细胞可能为巨噬细胞。而对照组(Cre-)小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达,不存在Cre重组酶的表达。

 

4.Cre重组酶在脾脏的表达情况

超强辅助Cre鼠

脾脏免疫荧光染色

 

Cre+小鼠在脾脏中存在少量的tdTomato蛋白红色荧光,表明在脾脏中Cre重组酶表达较低。而对照组(Cre-)小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达,不存在Cre重组酶的表达。

 

总结

Cx3cr1-iCre小鼠模型中Cre重组酶的表达主要定位于脑组织小胶质细胞中,也可以在肠道、肺部、肝脏和皮肤的部分部位检测到Cre重组酶介导的重组,这些发生重组的细胞可能是巨噬细胞,此外,在脾脏中也存在少量的重组信号。综上所述,该模型可作为小胶质细胞及其他组织巨噬细胞类型工具鼠使用。

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