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ACE2小鼠模型验证数据 赋能新冠科研攻关 两大技术 三类品系 多种打靶方案
新冠肺炎疫情的阴影笼罩全球,世界各国多支科研团队都在与时间赛跑研发疫苗,我国的新冠疫苗研发,在目前进入临床试验的14个疫苗、进入Ⅲ期临床试验的5款疫苗,在动物实验、在Ⅰ、Ⅱ期临床试验已经充分验证了疫苗的安全性。动物实验是疫苗研发中的必经阶段,只有经过动物实验的疫苗才能进入临床试验,早前国内各大科研单位争分夺秒展开疫苗研发,新冠疫苗实验小鼠模型也出现了供不应求,一鼠难求的局面。赛业生物利用自主研发的TurboKnockout技术和经过优化的CRISPR-Pro技术制备BALB/c、C57BL/6J、C57BL/6N三种背景品系的ACE2小鼠,并综合考虑不同基因编辑方式的优缺点,设计了多种基因打靶方案与构建策略,以满足客户不同研究目的和不同应用方向的需求。同时为致力于新冠肺炎相关研究者们提供ACE2小鼠模型的验证数据报告,希望赋能新冠科研攻关,如有需要新冠研究相关小鼠模型,欢迎拨打400-680-8038点击侧边栏在线咨询或邮件至info@cyagen.com咨询订购。
ACE2小鼠模型推荐-两大技术、三类品系、多种打靶方案
项目类型 品系 模型订购
ACE2人源化小鼠 C57BL/6J
C57BL/6N
BALB/c
ACE2基因敲入小鼠(H11位点) C57BL/6J
ACE2条件性敲入小鼠(Rosa26位点) C57BL/6J
BALB/c
C57BL/6N
ACE2完全性基因敲除小鼠 C57BL/6J
BALB/c
ACE2小鼠验证数据报告
C57BL/6J ACE2人源化小鼠
1. C57BL/6J ACE2人源化小鼠
● qPCR验证:
结果说明:
① 小鼠模型制备:名称为ACE2-KI,品系C57BL/6J;打靶方式设计:保留小鼠信号肽,用人的胞外域,跨膜域,胞内域替换小鼠胞外域,跨膜域,胞内域,使用内源性PolyA。
② 模型建立后,取小鼠不同组织进行qPCR验证,结果显示,在小肠、大肠、肾脏、肺部、气管中均有表达。说明该人源化模型能够成功表达人的ACE2蛋白,模型验证成功。
2. C57BL/6J ACE2人源化小鼠
● 免疫组化(IHC-P)验证:
结果说明:
① 小鼠模型制备:名称为ACE2-KI,品系C57BL/6J;打靶方式设计:保留小鼠信号肽,用人的胞外域,跨膜域,胞内域替换小鼠胞外域,跨膜域,胞内域,使用内源性PolyA。
② 模型建立后,取小鼠不同组织甲醛固定,石蜡包埋,进行免疫组化实验。结果显示,在肠、肾脏、肺部、气管中均有表达。进一步印证了该人源化模型能够成功表达人的ACE2蛋白,模型验证成功。
● C57BL/6J 阴性对照:
结果说明:
① 小鼠模型:品系C57BL/6J,阴性对照。
② 同品系空白对照小鼠,取小鼠不同组织甲醛固定,石蜡包埋,进行免疫组化实验。结果显示,在肠、肺部、肝脏、大脑、气管、肾、胃、心脏中均呈阴性结果。
3. C57BL/6J ACE2人源化小鼠
● WB各脏器表达差异验证:
检测结果:
分别检测了大肠、小肠、肾脏、大脑、气管和肺 6 个组织; ACE2 的理论条带大小为 92KD ,可能由于蛋白质内部发生糖基化修饰导致蛋白偏大。
从检测结果看:
1. 在大脑和肺部组织中,所有目标克隆相对于野生型没有检测到明显差异的条带;
2. 在肾脏组织中,理论条带大小:92KD;实际条带大小:120KD。
3. 在大肠组织中,理论条带大小:92KD;实际条带大小:130KD。
4. 在气管组织中,理论条带大小:92KD;实际条带大小:120KD。
5. 在小肠组织中,理论条带大小:92KD;实际条带大小:130KD。
ACE2 人源化小鼠中 ACE2 的表达情况在不同个体和不同组织间差异比较大。
BALB/c ACE2人源化小鼠
1. BALB/c ACE2人源化小鼠
● 免疫组化(IHC-P)验证:
结果说明:
① 小鼠模型:品系BALB/c,hACE2-KI。打靶方式设计:保留小鼠信号肽,用人的胞外域,跨膜域,胞内域替换小鼠胞外域,跨膜域,胞内域,使用内源性PolyA。
② 模型建立后,取小鼠不同组织甲醛固定,石蜡包埋,进行免疫组化实验。结果显示,在肠、肺部、肝脏、大脑、气管、肾、胃、心脏中均有不同程度的表达,印证了该人源化模型能够成功表达人的ACE2蛋白,模型验证成功。
● BALB/c 阴性对照:
结果说明:
① 小鼠模型:品系BALB/c,阴性对照。
② 同品系空白对照小鼠,取小鼠不同组织甲醛固定,石蜡包埋,进行免疫组化实验。结果显示,在肠、肺部、肝脏、大脑、气管、肾、胃、心脏中均呈阴性结果。
C57BL/6J ACE2基因敲入小鼠(H11位点)
1. C57BL/6J ACE2基因敲入小鼠(H11位点)
● 免疫组化(IHC-P)验证:
结果说明:
① 小鼠模型:品系C57BL/6J,H11-ACE2-KI。打靶方式设计:将人的信号肽,胞外域,跨膜域,胞内域插入到小鼠Rosa26位置。
② 模型建立后,取小鼠不同组织甲醛固定,石蜡包埋,进行免疫组化实验。结果显示,在肠、肺部、肝脏、大脑、气管、肾、胃、心脏中均有不同程度的表达,显示K18启动子依然存在非特异性表达情况,可根据不同实验需求进行选择。
● C57BL/6J 阴性对照:
结果说明:
① 小鼠模型:品系C57BL/6J,阴性对照。
② 同品系空白对照小鼠,取小鼠不同组织甲醛固定,石蜡包埋,进行免疫组化实验。结果显示,在肠、肺部、肝脏、大脑、气管、肾、胃、心脏中均呈阴性结果。
C57BL/6J ACE2完全性基因敲除小鼠
1. C57BL/6J ACE2完全性基因敲除小鼠
● 免疫组化(IHC-P)验证:
结果说明:
① 小鼠模型制备:名称为ACE2-KO,品系C57BL/6J。
② 模型建立后,取小鼠不同组织甲醛固定,石蜡包埋,进行免疫组化实验。结果显示,在肠、肺部、肝脏、大脑、气管、肾、胃、心脏中均呈阴性结果,证实了KO小鼠体内基本不表达ACE2,敲除模型成功。
● C57BL/6J 阴性对照:
结果说明:
① 小鼠模型:品系C57BL/6J,阴性对照。
② 同品系空白对照小鼠,,取小鼠不同组织甲醛固定,石蜡包埋,进行免疫组化实验。结果显示,在肠、肺部、肝脏、大脑、气管、肾、胃、心脏中均呈阴性结果。
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