新冠肺炎疫情的阴影笼罩全球，世界各国多支科研团队都在与时间赛跑研发疫苗，我国的新冠疫苗研发，在目前进入临床试验的14个疫苗、进入Ⅲ期临床试验的5款疫苗，在动物实验、在Ⅰ、Ⅱ期临床试验已经充分验证了疫苗的安全性。动物实验是疫苗研发中的必经阶段，只有经过动物实验的疫苗才能进入临床试验，早前国内各大科研单位争分夺秒展开疫苗研发，新冠疫苗实验小鼠模型也出现了供不应求，一鼠难求的局面。赛业生物利用自主研发的TurboKnockout技术和经过优化的CRISPR-Pro技术制备BALB/c、C57BL/6J、C57BL/6N三种背景品系的ACE2小鼠，并综合考虑不同基因编辑方式的优缺点，设计了多种基因打靶方案与构建策略，以满足客户不同研究目的和不同应用方向的需求。同时为致力于新冠肺炎相关研究者们提供ACE2小鼠模型的验证数据报告，希望赋能新冠科研攻关，如有需要新冠研究相关小鼠模型，欢迎拨打400-680-8038或点击侧边栏在线咨询或邮件至info@cyagen.com咨询订购。
ACE2小鼠模型推荐-两大技术、三类品系、多种打靶方案
| 项目类型 | 品系 | 模型订购 |
|---|---|---|
| ACE2人源化小鼠 | C57BL/6J | |
| C57BL/6N | ||
| BALB/c | ||
| ACE2基因敲入小鼠（H11位点） | C57BL/6J | |
| ACE2条件性敲入小鼠（Rosa26位点） | C57BL/6J | |
| BALB/c | ||
| C57BL/6N | ||
| ACE2完全性基因敲除小鼠 | C57BL/6J | |
| BALB/c |
ACE2小鼠验证数据报告
C57BL/6J ACE2人源化小鼠
1. C57BL/6J ACE2人源化小鼠
● qPCR验证：
结果说明：
① 小鼠模型制备：名称为ACE2-KI，品系C57BL/6J；打靶方式设计：保留小鼠信号肽，用人的胞外域，跨膜域，胞内域替换小鼠胞外域，跨膜域，胞内域，使用内源性PolyA。
② 模型建立后，取小鼠不同组织进行qPCR验证，结果显示，在小肠、大肠、肾脏、肺部、气管中均有表达。说明该人源化模型能够成功表达人的ACE2蛋白，模型验证成功。
2. C57BL/6J ACE2人源化小鼠
● 免疫组化（IHC-P）验证：
结果说明：
① 小鼠模型制备：名称为ACE2-KI，品系C57BL/6J；打靶方式设计：保留小鼠信号肽，用人的胞外域，跨膜域，胞内域替换小鼠胞外域，跨膜域，胞内域，使用内源性PolyA。
② 模型建立后，取小鼠不同组织甲醛固定，石蜡包埋，进行免疫组化实验。结果显示，在肠、肾脏、肺部、气管中均有表达。进一步印证了该人源化模型能够成功表达人的ACE2蛋白，模型验证成功。
● C57BL/6J 阴性对照：
结果说明：
① 小鼠模型：品系C57BL/6J，阴性对照。
② 同品系空白对照小鼠，取小鼠不同组织甲醛固定，石蜡包埋，进行免疫组化实验。结果显示，在肠、肺部、肝脏、大脑、气管、肾、胃、心脏中均呈阴性结果。
3. C57BL/6J ACE2人源化小鼠
● WB各脏器表达差异验证：
检测结果：
分别检测了大肠、小肠、肾脏、大脑、气管和肺 6 个组织； ACE2 的理论条带大小为 92KD ,可能由于蛋白质内部发生糖基化修饰导致蛋白偏大。
从检测结果看：
1. 在大脑和肺部组织中，所有目标克隆相对于野生型没有检测到明显差异的条带；
2. 在肾脏组织中，理论条带大小：92KD；实际条带大小：120KD。
3. 在大肠组织中，理论条带大小：92KD；实际条带大小：130KD。
4. 在气管组织中，理论条带大小：92KD；实际条带大小：120KD。
5. 在小肠组织中，理论条带大小：92KD；实际条带大小：130KD。
ACE2 人源化小鼠中 ACE2 的表达情况在不同个体和不同组织间差异比较大。
BALB/c ACE2人源化小鼠
1. BALB/c ACE2人源化小鼠
● 免疫组化（IHC-P）验证：
结果说明：
① 小鼠模型：品系BALB/c，hACE2-KI。打靶方式设计：保留小鼠信号肽，用人的胞外域，跨膜域，胞内域替换小鼠胞外域，跨膜域，胞内域，使用内源性PolyA。
②
模型建立后，取小鼠不同组织甲醛固定，石蜡包埋，进行免疫组化实验。结果显示，在肠、肺部、肝脏、大脑、气管、肾、胃、心脏中均有不同程度的表达，印证了该人源化模型能够成功表达人的ACE2蛋白，模型验证成功。
● BALB/c 阴性对照：
结果说明：
① 小鼠模型：品系BALB/c，阴性对照。
② 同品系空白对照小鼠，取小鼠不同组织甲醛固定，石蜡包埋，进行免疫组化实验。结果显示，在肠、肺部、肝脏、大脑、气管、肾、胃、心脏中均呈阴性结果。
C57BL/6J ACE2基因敲入小鼠（H11位点）
1. C57BL/6J ACE2基因敲入小鼠（H11位点）
● 免疫组化（IHC-P）验证：
结果说明：
① 小鼠模型：品系C57BL/6J，H11-ACE2-KI。打靶方式设计：将人的信号肽，胞外域，跨膜域，胞内域插入到小鼠H11位置。
②
模型建立后，取小鼠不同组织甲醛固定，石蜡包埋，进行免疫组化实验。结果显示，在肠、肺部、肝脏、大脑、气管、肾、胃、心脏中均有不同程度的表达，显示K18启动子依然存在非特异性表达情况，可根据不同实验需求进行选择。
● C57BL/6J 阴性对照：
结果说明：
① 小鼠模型：品系C57BL/6J，阴性对照。
② 同品系空白对照小鼠，取小鼠不同组织甲醛固定，石蜡包埋，进行免疫组化实验。结果显示，在肠、肺部、肝脏、大脑、气管、肾、胃、心脏中均呈阴性结果。
C57BL/6J ACE2完全性基因敲除小鼠
1. C57BL/6J ACE2完全性基因敲除小鼠
● 免疫组化（IHC-P）验证：
结果说明：
① 小鼠模型制备：名称为ACE2-KO，品系C57BL/6J。
② 模型建立后，取小鼠不同组织甲醛固定，石蜡包埋，进行免疫组化实验。结果显示，在肠、肺部、肝脏、大脑、气管、肾、胃、心脏中均呈阴性结果，证实了KO小鼠体内基本不表达ACE2，敲除模型成功。
● C57BL/6J 阴性对照：
结果说明：
① 小鼠模型：品系C57BL/6J，阴性对照。
② 同品系空白对照小鼠，，取小鼠不同组织甲醛固定，石蜡包埋，进行免疫组化实验。结果显示，在肠、肺部、肝脏、大脑、气管、肾、胃、心脏中均呈阴性结果。
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