产品编号:C001359
品系背景:C57BL/6J
传代方案:杂合与杂合或纯合与纯合互配
主要表达部位:II型肺泡细胞
品系描述
Sftpc基因编码肺相关表面活性蛋白C (SPC),这是一种极其疏水的表面活性蛋白,对肺功能和出生后的体内平衡至关重要。它编码一个197个氨基酸的脱辅基蛋白,随后被切割成成熟的表面活性蛋白C (SP-C),与特定的磷脂和蛋白质一起掺入到II型肺泡细胞中的层状体中,通过调节肺泡气液界面的胞外分泌而释放,在调节肺力学中发挥关键作用。
当Sftpc-iCre小鼠与含有loxP位点的小鼠杂交时,子代可在在II型肺泡细胞中产生由Cre重组酶介导loxP位点间的序列重组。该品系纯合及杂合小鼠可育,生长正常。
构建方式
将IRES-iCre元件敲入Sftpc基因的3'UTR 中,模拟内源基因的表达模式,插入元件不会干扰Sftpc基因的功能。
注意事项
Cre重组酶位于14号染色体上,配繁时请避免使用与Cre工具鼠同条染色体上打靶的基因编辑小鼠进行配繁。
验证数据
将Sftpc-iCre小鼠与Rosa26-LSL-tdTomato小鼠配种,产生双基因杂合子代小鼠。采集肺组织,通过冰冻切片及免疫组化观察荧光发生情况,从而确认Cre蛋白的表达情况。
实验组(上):Sftpc-iCre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]
对照组(下):Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]
荧光信号 |
DAPI |
tdTomato |
曝光时间 |
2ms |
50ms |
a. 肺部荧光发生情况
检测结果:肺脏中对应细胞检测到强烈的tdTomato橙色荧光信号。
注:上述采用橙光段观察荧光
dTomato峰值:激发554,发射581
橙光波长范围:590-610nm 红光波长范围:625-740nm
b. 免疫组化检测结果
检测结果:肺脏中相应细胞显示出明显tdTomato信号。
综上所述,该模型在II型肺泡细胞中有显著的荧光重组。