H11-Myh6-iCre小鼠|H11-Myh6-iCre工具鼠|价格

产品编号：I001038

品系背景：C57BL/6J

传代方案：纯合与纯合互配

主要表达部位：心肌细胞

品系描述

心肌肌球蛋白是由两个重链亚基、两个轻链亚基和两个调节亚基组成的六聚体。肌球蛋白重链6（Myosin heavy chain 6，MYH6）编码的蛋白是心肌肌球蛋白的α重链亚基。该基因位于编码心肌肌球蛋白β重链亚基的基因下游约4kb处，其突变与家族性肥厚性心肌病和房间隔缺损有关。MYH6主要在心肌细胞中表达，骨骼肌和其它某些部位的平滑肌也存在少量表达。

H11-Myh6-iCre小鼠利用基因编辑技术构建，由小鼠Myh6基因内源性启动子驱动iCre（改进后的Cre重组酶）基因表达元件在小鼠体内表达。可以在心肌细胞中观察到Cre重组酶的高表达，在骨骼肌和平滑肌中也可见少量的Cre酶活性。当该品系小鼠与含有loxP位点的小鼠杂交后，主要可在子代小鼠的心肌细胞中发生由Cre重组酶介导的loxP位点间的序列重组。

构建方式

利用基因编辑技术，在小鼠H11安全位点插入由小鼠Myh6内源性启动子驱动的iCre基因表达元件。

验证数据

检测方法

将H11-Myh6-iCre小鼠与Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配，产生双基因杂合子代小鼠，Cre酶介导的重组将导致tdTomato蛋白在子代Cre阳性细胞中表达。采集6周龄子代小鼠的心脏、肺部、肾脏、骨骼肌、子宫和睾丸等组织，通过免疫荧光染色检测tdTomato蛋白信号的分布以确定Cre重组酶的表达情况。

基因型

实验组（Cre+）：H11-Myh6-iCre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]

对照组（Cre-）：Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/CKI]

检测结果

Cre重组酶在心肌细胞中的表达情况

图1. 心脏组织免疫荧光染色。Cre+（H11-Myh6-iCre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）小鼠在心肌细胞中存在大量的tdTomato蛋白红色荧光，表明在该部位存在较强的Cre重组酶表达。对照组（Cre-）小鼠的对应组织中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。

Cre重组酶在肾脏、肺部和骨骼肌中的表达情况

图2. 肾脏、肺部和骨骼肌组织免疫荧光染色。Cre+小鼠在肾脏、肺部和骨骼肌中均存在少量的tdTomato蛋白红色荧光，表明在这些部位存在少许的Cre重组酶的活性。对照组（Cre-）小鼠的对应组织中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。

Cre重组酶在子宫和睾丸中的表达情况

图3. 子宫和睾丸组织免疫荧光染色。Cre+小鼠在子宫固有层细胞和睾丸间质细胞存在极微量的tdTomato蛋白红色荧光，表明在该组织中存在Cre重组酶的活性，但其表达量极低。对照组（Cre-）小鼠的对应组织中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。

总结

H11-Myh6-iCre小鼠模型中Cre重组酶的表达主要定位于心脏心肌细胞，在肾脏、肺部和骨骼肌中的部分组织中也存在少量的Cre重组酶活性，此外，在子宫和睾丸也可检测到极微量的Cre重组酶表达。综上所述，该模型中Cre重组酶的表达模式与小鼠内源性Myh6基因大致相同，可作为心肌细胞特异性工具鼠使用。

注意事项

该品系Cre重组酶基因插入的H11位点位于小鼠第11号染色体上, 请避免使用与Cre工具鼠同条染色体上打靶的基因编辑小鼠进行配繁。