Elf5-Cre小鼠|Elf5-Cre工具鼠|价格

产品编号：C001389

品系背景：C57BL/6J

传代方案：杂合与野生型互配

主要表达部位：胎盘滋养层细胞、乳腺、子宫

品系描述

E26转化序列（E26 transforming sequence, ETS）转录因子家族对乳腺发育过程中内细胞团的胚胎形成或细胞亚型的确定具有关键作用，E74样ETS转录因子5（E74 like ETS transcription factor 5, ELF5）基因编码上皮特异性ETS家族转录因子的一员，除了在调节角质形成细胞终末分化的后期阶段发挥作用外，ELF5还对含有腺体上皮的组织（例如唾液腺和前列腺）中的许多上皮特异性基因起着调节作用^[1]。ELF5是乳腺细胞亚型转化分化过程中的重要调节因子，也被认为是乳腺癌中的肿瘤抑制转录因子^[2-3]。

Elf5-Cre小鼠利用基因编辑技术构建，将P2A-Cre表达元件插入小鼠内源性Elf5基因中，Cre重组酶的表达模式与内源基因相似。当该品系小鼠与含有loxP位点的小鼠杂交后，可在子代小鼠的乳腺和子宫等组织中发生由Cre重组酶介导的loxP位点间的序列重组。该品系杂合小鼠是可存活且可育的，不可纯合。

构建方式

通过基因编辑技术将“P2A-Cre-WPRE-rBG pA”基因表达元件插入小鼠内源性Elf5基因终止密码子处。

验证数据

检测方法

将Elf5-Cre小鼠与Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配，产生双基因杂合子代小鼠，Cre酶介导的重组将导致tdTomato蛋白在子代Cre阳性细胞中表达。分别采集6周龄子代小鼠的乳腺、子宫、卵巢、睾丸、附睾、前列腺、肾上腺和皮肤组织，通过免疫荧光染色观察Cre重组酶的表达情况。

基因型

实验组（Cre+）：Elf5-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]

对照组（Cre-）：Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/CKI]

检测结果

Cre重组酶在子宫中的表达情况

图1. 雌性小鼠子宫免疫荧光染色。Cre+（Elf5-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）雌性小鼠在子宫细胞中存在大量的tdTomato蛋白红色荧光，表明在该部位存在较多的Cre重组酶介导的重组发生，而对照组（Cre-）小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。

Cre重组酶在雌性乳腺和卵巢中的表达情况

图2. 雌性小鼠乳腺和卵巢免疫荧光染色。Cre+（Elf5-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）雌性小鼠在乳腺中存在大量的tdTomato蛋白红色荧光信号，其定位与DAPI信号几乎完全重合，表明在该部位存在大量的Cre重组酶表达，对照组（Cre-）小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。而在卵巢中并不存在荧光信号，表明在该部位不存在Cre重组酶介导的重组。

Cre重组酶在雄性生殖系统和前列腺中的表达情况

图3. 雄性小鼠睾丸、附睾和前列腺免疫荧光染色。Cre+（Elf5-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）雄性小鼠在睾丸的疑似精子发生区域、附睾和前列腺中存在大量红色荧光，显示在此类区域中发生Cre重组酶介导的重组，而对照组（Cre-）小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶介导的重组。

Cre重组酶在皮肤和输尿管中的表达情况

图4. 皮肤和输尿管免疫荧光染色。Cre+（Elf5-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）小鼠在皮肤毛囊部份细胞及部份皮脂腺细胞和输尿管中存在部分的红色荧光，显示在此类区域中Cre发生重组；而对照组（Cre-）小鼠中检测不到tdTomato红色荧光的表达，不存在Cre重组酶的表达。

Cre重组酶在肾上腺中的表达情况

图5. 肾上腺免疫荧光染色。Cre+（Elf5-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）小鼠在肾上腺上无法检测到红色荧光，显示在此区域中无Cre重组酶介导的重组发生。

总结

Elf5-Cre小鼠模型中Cre重组酶的表达主要定位于子宫的柱状上皮细胞、乳腺导管上皮细胞和皮肤的部份毛囊及皮脂腺细胞中，同时可在输尿管和雄性小鼠的睾丸、附睾和前列腺中部分检测到由Cre重组酶介导的重组，而在卵巢和肾上腺中几乎未发现重组信号。该工具鼠模型Cre重组酶表达与小鼠内源性Elf5基因相似，具有良好的特异性。

注意事项

该模型Cre重组酶表达元件插入位点位于2号染色体，请避免使用与Cre工具鼠同条染色体上打靶的基因编辑小鼠进行配繁。

参考文献

Lee HJ, Ormandy CJ. Elf5, hormones and cell fate. Trends Endocrinol Metab. 2012 Jun;23(6):292-8.
Qu X, Li Q, Tu S, Yang X, Wen W. ELF5 inhibits the proliferation and invasion of breast cancer cells by regulating CD24. Mol Biol Rep. 2021 Jun;48(6):5023-5032.
Piggin CL, Roden DL, Gallego-Ortega D, Lee HJ, Oakes SR, Ormandy CJ. ELF5 isoform expression is tissue-specific and significantly altered in cancer. Breast Cancer Res. 2016 Jan 7;18(1):4.