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H11-Col2a1-iCre小鼠

产品编号:C001355

品系背景:C57BL/6J

传代方案:杂合与杂合或纯合与纯合互配

主要表达部位:软骨细胞

 

品系描述

Col2a1基因编码II型胶原蛋白的alpha-1链,这是一种在软骨和眼睛玻璃体液中发现的纤维状胶原蛋白。II型胶原蛋白可增加结缔组织的结构和强度,主要存在于软骨、填充眼球(玻璃体)、内耳和脊椎椎骨之间的椎间盘中心部分的胶状物质(髓核)。

当与含有loxP位点的小鼠杂交时,子代可在软骨细胞中产生由Cre重组酶介导loxP位点间的序列重组。该品系纯合及杂合小鼠发育正常,可育。

 

构建方式

在C57BL/6J小鼠中,将Col2a1启动子及iCre元件插入到H11安全位点中。

 

注意事项

该品系Cre重组酶基因表达元件的插入位点位于11号染色体上,请避免使用与Cre工具鼠同条染色体上打靶的基因编辑小鼠进行配繁。

 

验证数据

  • 检测方法

将H11-Col2a1-iCre与Rosa26-LSL-tdTomato小鼠配种,产生双基因杂合子代小鼠,子代可在表达Cre的细胞中表达红色荧光。采集关节及剑突组织,通过冰冻切片及免疫组化观察荧光发生情况。

  • 基因型

实验组(Cre+):H11-Col2a1-iCre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]

对照组(Cre-):Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]

  • 检测结果
  1. 关节和刺突荧光发生情况

检测结果:关节软骨及剑突显示出明显tdTomato橙色荧光信号。

注:1)图中黑色的圈为用光源激发时导致;2)上述采用橙光段观察荧光:

dTomato峰值:激发554,发射581

橙光波长范围:590-610nm  红光波长范围:625-740nm

 

b. 膝关节免疫组化

检测结果:膝关节中对应细胞显示出明显tdTomato信号。

 

  • 总结

综上所述,该模型在软骨细胞中有显著的荧光重组,同时在其他组织(心、肺、胃、脑、棕脂、关节、剑突)中可见重组条带(此处未展示该部分实验结果)。

 

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