Pax6-Cre小鼠|Pax6-Cre工具鼠|价格-赛业生物

产品编号: C001279

品系背景: C57BL/6J

传代方案: 杂合 x WT

主要表达部位：视网膜、胰腺原始细胞等

品系描述

Pax6基因属于Pax基因家族，是一种进化保守的基因，其编码的蛋白质是一种转录因子。在胚胎发育过程中，Pax6基因对眼睛、神经系统和胰腺等器官的形态发育起到重要的调控作用。在眼睛的发育过程中，Pax6基因是主要的调控基因之一，广泛表达于神经外胚层和表皮外胚层。该基因受多个增强子调控，这些增强子位于转录起始位点的上游和下游，距离可达数十或数百个碱基。Pax6基因或其调控元件的突变会导致多种眼部畸形，如虹膜缺损、白内障和视网膜发育不良等。此外，Pax6基因还与糖尿病和癌症等疾病有关。

Pax6-Cre小鼠是通过基因编辑技术将Cre重组酶基因表达元件敲入小鼠内源Pax6基因中构建的。这种小鼠中Cre重组酶的表达模式与内源性Pax6基因相似。当与含有loxP位点的小鼠杂交后，子代小鼠早期胚胎发育过程中的视网膜中会发生由Cre重组酶介导的loxP位点间序列删除。该品系杂合小鼠发育正常且可育，而纯合小鼠眼部发育不全。

构建方式

将P2A-Cre基因表达元件敲入小鼠内源Pax6基因中，模拟小鼠内源基因的表达模式。

验证数据

检测方法

将Pax6-Cre小鼠与Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配，产生双基因杂合子代小鼠。在这些子代小鼠中，Cre酶介导的重组将导致tdTomato蛋白在Cre阳性细胞中表达。分别采集6周龄子代小鼠的眼球、脑部和胰腺组织，通过免疫荧光染色观察tdTomato蛋白的表达情况，以确定Cre重组酶的活性。

基因型：

实验组（Cre+）：Pax6-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]

对照组（Cre-）：Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/CKI]

检测结果：

a. Cre重组酶在眼部组织中的表达情况

图1. 眼部组织免疫荧光染色。在Cre+（Pax6-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）小鼠的视网膜中，可以检测到tdTomato蛋白的红色荧光。同时，眼角膜也存在部分红色荧光，并且在角膜上皮细胞中大量积累。这表明在该部位存在较多的Cre重组酶介导的重组发生。而在对照组（Cre-）小鼠中，未检测到tdTomato红色荧光信号，说明不存在Cre重组酶的表达。

b. Cre重组酶在脑部和第三脑室中的表达情况

图2. 脑部组织免疫荧光染色。在Cre+（Pax6-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）小鼠的第三脑室和侧脑室中，存在少量的tdTomato蛋白红色荧光信号。这些信号与DAPI信号重合，表明在该部位存在少量的Cre重组酶表达。而在对照组（Cre-）小鼠中，未检测到tdTomato红色荧光信号，说明不存在Cre重组酶的表达。

c. Cre重组酶在胰腺中的表达情况

图3. 胰腺组织免疫荧光染色。在Cre+（Pax6-Cre[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]）小鼠的胰腺中，存在少量的tdTomato蛋白红色荧光信号。这些信号与DAPI信号重合，表明在该部位存在少量的Cre重组酶表达。而在对照组（Cre-）小鼠中，未检测到tdTomato红色荧光信号，说明不存在Cre重组酶的表达。

总结

在Pax6-Cre小鼠中，Cre重组酶的表达主要定位于眼部组织。同时，在脑部和胰腺部分组织中也可检测到少量由Cre重组酶介导的重组。此外，免疫组化结果显示，子代小鼠眼角膜组织明显增厚并与晶状体发生黏连，前房缺失和区域视网膜上皮组织中断现象也存在。这些现象可能是由Cre重组酶的脱靶效应或毒性导致（内部验证数据，未公开）。该模型中Cre重组酶的表达模式与小鼠内源性Pax6基因相似，具有良好的组织特异性。

注意事项

1. 该品系Cre重组酶基因表达元件插入位点位于小鼠第2号染色体上, 请避免使用与Cre工具鼠同条染色体上打靶的基因编辑小鼠进行配繁。

2. 纯合Pax6-Cre小鼠的眼部发育存在缺陷，在与flox小鼠配繁时，请将Cre基因表达元件维持为杂合状态。