Cdh16-MerCreMer小鼠|Cdh16-MerCreMer工具鼠|价格

产品编号：C001432

品系背景：C57BL/6J

传代建议：纯合与纯合互配

主要表达部位：肾小管上皮细胞

品系描述

钙粘蛋白16（Cadherin 16, CDH16）基因编码的钙依赖性膜相关糖蛋白是钙粘蛋白超家族的成员，是一种参与胚胎发育和细胞生长的细胞粘附分子。该蛋白仅在肾脏中表达，因此也被称为肾脏特异性钙粘蛋白（ksp-钙粘蛋白），其作为同型细胞识别的主要介质，在组织发育的形态发育方向上发挥作用，尤其在胚胎发育过程肾小管的形成中起着关键作用。

Cdh16-MerCreMer小鼠利用基因编辑技术构建，通过将他莫昔芬（Tamoxifen）诱导型Cre重组酶蛋白MerCreMer表达元件插入小鼠Cdh16基因终止密码子下游而获得，MerCreMer的表达与内源基因的表达模式相似，同时小鼠Cdh16基因的表达不受影响。在未诱导前，MerCreMer仅存在于细胞质中，只有在他莫昔芬处理后，才能进入细胞核发挥重组作用。当该品系小鼠与含有loxP位点的小鼠杂交后，经他莫昔芬诱导后可在子代的肾小管上皮细胞中发生由Cre重组酶介导的loxP位点间的序列重组。

构建方式

利用基因编辑技术将“IRES-MerCreMer”基因表达元件插入小鼠Cdh16基因的3'UTR中。

图1. Cdh16-MerCreMer小鼠基因编辑打靶示意图

验证数据

检测方法

将Cdh16-MerCreMer小鼠精子复苏并与Rosa26-LSL-tdTomato小鼠卵细胞进行受精，产生双杂合子代小鼠，在子代小鼠发育到6周龄时，连续5天进行Tamoxifen诱导（灌胃，4mg/只）。Cre重组酶介导LSL元件的删除将导致tdTomato蛋白在子代Cre阳性细胞中的表达，诱导一周后采集小鼠的肺部和肾脏等组织，通过免疫荧光染色和免疫组化检测tdTomato蛋白信号的分布以确定Cre重组酶的表达情况。

实验分组

Cre+Tam+：Cdh16-MerCreMer[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]；小鼠经Tamoxifen诱导；

Cre+Tam-：Cdh16-MerCreMer[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]，小鼠未经Tamoxifen诱导。

检测结果

肾脏组织免疫组化

图2. 肾脏组织免疫组化结果。在他莫西芬诱导后，Cdh16-MerCreMer[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]小鼠肾小管上皮细胞有大量的tdTomato阳性信号，表明Cre重组酶在肾脏组织中的强烈表达；而未经他莫西芬诱导组的组织中不存在tdTomato的表达，没有Cre重组酶的活性。

肾脏组织免疫荧光染色

图3. 肾脏组织免疫荧光染色结果。在他莫西芬诱导后，Cdh16-MerCreMer[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]小鼠肾小管上皮细胞中存在大量的tdTomato阳性信号，表明在该部位具有强烈的Cre重组酶活性；而在未诱导组中也存在少量的红色荧光信号，表明该模型在肾小管上皮细胞中的少量诱导前泄漏。

肺部组织免疫荧光染色

图4. 肺部组织免疫荧光染色结果。在他莫西芬诱导后，Cdh16-MerCreMer[KI/+];Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]小鼠肺部部分细胞中存在tdTomato阳性信号，表明在该部位存在少量的Cre重组酶活性；未诱导组中不存在红色荧光信号，没有Cre重组酶的表达。

总结

Cdh16-MerCreMer小鼠模型中Cre重组酶的表达主要定位于肾小管上皮细胞，同时在肺部组织的某些细胞中也存在Cre重组酶的活性。需要注意的是，在诱导前的肾小管上皮细胞存在少量Cre重组酶表达的泄漏。

注意事项

该品系中Cre重组酶基因表达元件插入位点位于8号染色体上，请避免使用与Cre工具鼠同条染色体上打靶的基因编辑小鼠进行配繁。