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H11-CAG-MerCreMer小鼠

产品编号:C001356

品系背景:C57BL/6J

传代方案:阳性阳性互配

主要表达部位:全身性

 

品系描述

CAG启动子是鸡β肌动蛋白启动子/增强子与巨细胞病毒早期增强子偶联,常用于驱动哺乳动物基因的高水平表达。H11-CAG-MerCreMer小鼠为Tamoxifen诱导型工具鼠,在CAG启动子下驱动全身性表达MerCreMer重组酶。当与含有loxP位点的小鼠杂交时,子代可在他莫西芬诱导后在广泛的细胞和组织中产生由Cre重组酶介导的loxP位点间的序列重组。该品系纯合可育。

 

构建方式

在C57BL/6J小鼠中,将CAG-MerCreMer敲入到鼠源的H11安全位点。

 

研究应用

该模型为Tamoxifen诱导型工具鼠,可作为全身性诱导loxP重组的Cre工具鼠。例如,将该工具鼠与条件性敲除模型小鼠配繁,可全身性删除两个loxP之间的序列。

 

验证数据

  • Cre表达检测方法

将H11-CAG-MerCreMer小鼠与Rosa26-LSL-tdTomato小鼠配种,产生双基因杂合子代小鼠。当子代小鼠5-6周龄时,每只小鼠连续5天以1mg的Tamoxifen剂量腹腔注射,诱导MerCreMer进入细胞核对基因组flox位置进行重组。

注射后10天取不同组织做PCR基因型鉴定,检测是否发生重组(即出现CreDel条带)。

  • 实验鼠基因型

实验组(上):H11-CAG-MerCreMer[KI/+]; Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]

对照组(下):Rosa26-LSL-tdTomato[CKI/+]

  • 不同组织重组后CreDel条带情况

 

检测结果:Tamoxifen诱导后在所检测组织中均可见较明显的CreDel条带。

综上所述,该模型在Tamoxifen诱导后在全身组织发挥重组作用,且在未诱导前几乎检测不到CreDel条带(此处未展示该部分实验结果)。

 

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