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K18-hACE2-2A-CreERT2

产品编号:C001244

背景:C57BL/6J

基因型:纯合子

 

简介

血管紧张素转换酶2(ACE2)是SARS-CoV-2病毒侵入人体最主要的细胞表面受体,但由于物种间的差异,SARS-CoV-2病毒无法与野生型啮齿动物的ACE2受体结合,通过基因编辑技术将小鼠Ace2替换为人源ACE2,可获得稳定表达人类ACE2受体的人源化ACE2小鼠(hACE2)。该小鼠模型在人角蛋白K18启动子的驱动下,在上皮细胞表达人源ACE2,包括开始受感染的气道上皮细胞。小鼠模型带有CreERT2元件,可使用Tamoxifen诱导型Cre工具鼠对其进行时间特异性调控表达。

K18-hACE2小鼠可以感染SARS-CoV-2病毒,导致严重的疾病,其特征在于体重减轻,呼吸迅速,驼背的姿势和不活动。这些小鼠以剂量依赖的方式对病毒攻击作出反应,从而允许研究高病毒滴度攻击的小鼠的严重急性呼吸道疾病以及低剂量轻度感染的长期影响。

该模型应按照CDC/ABSA/WHO预防人类感染SARS-CoV-2病毒的指南处理。在使用这些小鼠工作时,应始终使用适当的PPE和处理方法。

 

研究应用

K18-hACE2转基因小鼠表达人ACE2,这是严重急性呼吸系统综合症冠状病毒(SARS-CoV)用于获得细胞进入的受体。 人角蛋白18启动子将表达导向上皮,包括通常开始感染的气道上皮。 由于K18-hACE2对SARS-CoV-2和SARS-CoV病毒敏感,因此它们可用于研究针对COVID-19和SARS的抗病毒治疗。

 

构建方式

 

模型验证

  • qPCR

模型建立后,取该人源化模型的不同组织进行qPCR验证,结果显示,在小肠、大肠、肾脏、气管、肺部及大脑中均有表达。

 

  • Western Blot

 

模型建立后,取该人源化模型的不同组织进行Western Blot验证,结果显示,在肾脏、大脑、肺部、气管、大肠及小肠中均有表达。说明该人源化模型能够成功表达人的ACE2蛋白,模型验证成功。

 

  • 动物感染试验

 SARS-CoV-2通过鼻腔滴入小鼠体内进行病毒感染测试,该试验在生物安全级别实验室开展。

 

客户精选案例

图1. 体外细胞-细胞融合实验证明了人的ACE2蛋白能与病毒刺突互作,但是小鼠的蛋白无法互作。研究人员在hACE2合胞体中不仅检测到了S2'条带,还观察到了合胞体形成的绿色荧光信号[1]

 

[1] Yu, S.; Zheng, X.; Zhou, B.; Li, J.; Chen, M.; Deng, R.; Wong, G.; Lavillette, D.; Meng, G., SARS-CoV-2 spike engagement of ACE2 primes S2' site cleavage and fusion initiation. Proceedings of the National Academy of Sciences 2022, 119 (1), e2111199119.

 

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