SD-Rosa26-LSL-tdTomato大鼠 |SD-Rosa26-LSL-tdTomato大鼠构建

产品编号：CR003

品系背景：Crl:CD(SD)

传代建议：杂合与野生型互配、杂合与杂合（纯合）互配或纯合与纯合互配

品系描述

本品系为携带红色荧光蛋白报告基因（tdTomato）表达元件的条件性激活红色荧光报告大鼠品系，在正常情况下，tdTomato基因表达元件上游存在的表达终止元件（loxP-Stop-loxP, LSL）会阻断tdTomato的表达。当这种大鼠与表达Cre重组酶的大鼠交配后，可在其子代的Cre阳性细胞及这些细胞的下游分化衍生谱系中发生由Cre重组酶介导的loxP位点间表达终止元件的删除，实现tdTomato蛋白的条件性表达，继而可通过荧光显微镜在相关组织或细胞中观测到强烈的tdTomato红色荧光信号。

通过将SD-Rosa26-LSL-tdTomato大鼠与组织特异性或诱导性Cre大鼠交配的方法，可实现tdTomato蛋白表达时间和部位的高度选择性和可控性。验证数据显示，当SD-Rosa26-LSL-tdTomato大鼠经Cre重组酶诱导后，其脑部，心脏，肝脏，脾脏，肾脏，胸腺，胰腺，小肠，大肠，肌肉，脚趾，耳朵和尾巴等不同Cre阳性组织中均存在强烈的红色荧光信号。因此，SD-Rosa26-LSL-tdTomato大鼠可用于细胞谱系追踪和特定基因的表达调控等领域的研究。在引入Cre重组酶之前，该品系大鼠体内可能存在非常低水平的tdTomato诱导前表达泄漏，但Cre重组酶介导的tdTomato表达水平会明显高于诱导前的泄漏水平。

构建方式

通过基因编辑技术将CAG promoter-loxP-PGK-Neo-6xSV40 pA-loxP-tdTomato-WPRE-BGH pA基因表达元件整合到大鼠Rosa26安全位点中。

研究应用：细胞谱系追踪；细胞分裂和分化研究；基因表达调控研究。

验证数据

SD-Rosa26-LSL-tdTomato大鼠不同组织和器官中tdTomato蛋白的表达检测

图1. SD-Rosa26-LSL-tdTomato大鼠在Cre重组酶诱导后不同组织和器官中红色荧光蛋白（tdTomato）的表达检测。分别取未经Cre重组酶诱导大鼠（Cre-）和经Cre重组酶诱导后大鼠（Cre+）的脑部、心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、胰腺、小肠、大肠、肌肉、脚趾、耳朵和尾巴等组织，在荧光显微镜下观察红色荧光的发生情况。结果显示，该工具鼠在Cre重组酶诱导前的各组织中均不存在tdTomato蛋白的表达，Cre重组酶诱导可导致几乎所有组织中都出现不同强度红色荧光信号。

注意事项

该品系LSL-tdTomato表达元件插入的ROSA26位点位于大鼠4号染色体上，请避免使用Cre重组酶基因表达元件整合位点与该品系大鼠在同条染色体上的Cre工具鼠进行配繁。