Atp7b基因敲除小鼠|威尔逊病小鼠|Atp7b KO小鼠_构建

产品编号：C001267

品系背景：C57BL/6N

繁殖：杂合雌鼠×纯合雄鼠

品系描述

ATP7B基因编码的铜离子转运ATP酶β肽是P型阳离子转运ATP酶家族的成员，该家族利用三磷酸腺苷（ATP）分子中储存的能量将金属运入和运出细胞。ATP7B蛋白由多个跨膜结构域、一个ATP酶共识序列、一个铰链结构域和一个磷酸化位点以及至少2个假定的铜结合位点等组成^[1]。该蛋白主要存在于肝脏中，少量存在于肾脏和大脑，其功能是作为铜转运ATP酶，在将铜从肝脏运送到身体其他部位方面发挥着作用；铜是维持正常细胞功能的某些酶的重要组成部分，ATP7B蛋白对清除体内多余的铜十分重要。该基因的突变与威尔逊病有关，其特点是随着功能性ATP7B蛋白质的缺失，体内多余铜的清除受到影响而导致铜积累到毒性水平，损害肝脏和大脑等组织和器官^[2-4]。

本模型为Atp7b基因缺失小鼠，利用基因编辑技术敲除人ATP7B基因在小鼠体内的同源基因Atp7b。该小鼠缺少ATP7B蛋白的表达，可用于威尔逊病、急性肝衰竭和脂肪性肝炎等铜代谢紊乱相关疾病的研究。该品系杂合小鼠是可存活且可育的，纯合小鼠预期寿命缩短。

构建方式

Atp7b基因位于小鼠8号染色体上，利用基因编辑技术敲除了Atp7b基因的Exon2~20。

研究应用

铜代谢、威尔逊病、急性肝衰竭、脂肪性肝炎及其它铜代谢紊乱相关疾病研究。

验证数据

肝脏Atp7b mRNA表达检测

图1. Atp7b KO小鼠和野生型小鼠Atp7b mRNA表达检测。与野生型（Control）相比，Atp7b KO小鼠（Model）肝脏中几乎不存在Atp7b mRNA的表达。

肝脏Atp7b蛋白表达检测

图2. Atp7b KO小鼠和野生型小鼠Atp7b蛋白表达检测。与野生型对照组（WT）相比，Atp7b KO小鼠（KO）肝脏中几乎不存在Atp7b蛋白的表达。

结果讨论

通过对Atp7b基因进行敲除构建Atp7b KO小鼠模型，以此研究威尔逊病、急性肝衰竭和脂肪性肝炎等铜代谢紊乱相关疾病。初步的数据显示，由于Atp7b基因表达的缺失，该模型中Atp7b mRNA和Atp7b蛋白的表达随之缺失。该模型小鼠后续可用于威尔逊病、急性肝衰竭和脂肪性肝炎等铜代谢紊乱相关疾病的研究。

参考文献

Cater MA, Forbes J, La Fontaine S, Cox D, Mercer JF. Intracellular trafficking of the human Wilson protein: the role of the six N-terminal metal-binding sites. Biochem J. 2004 Jun 15;380(Pt 3):805-13.
Panagiotakaki E, Tzetis M, Manolaki N, Loudianos G, Papatheodorou A, Manesis E, Nousia-Arvanitakis S, Syriopoulou V, Kanavakis E. Genotype-phenotype correlations for a wide spectrum of mutations in the Wilson disease gene (ATP7B). Am J Med Genet A. 2004 Dec 1;131(2):168-73.
Ferenci P. Regional distribution of mutations of the ATP7B gene in patients with Wilson disease: impact on genetic testing. Hum Genet. 2006 Sep;120(2):151-9.
Fatemi N, Sarkar B. Molecular mechanism of copper transport in Wilson disease. Environ Health Perspect. 2002 Oct;110 Suppl 5(Suppl 5):695-8.