B6-hCALCRL小鼠|B6-hCALCRL小鼠构建

产品编号：C001497

品系背景：C57BL/6J

传代建议：纯合与纯合互配

品系描述

降钙素受体样受体（Calcitonin receptor like receptor，CALCRL）基因编码的产物是一种七次跨膜的G蛋白偶联受体。这种受体介导了降钙素基因相关肽（CGRP）和肾上腺髓质素（ADM）的多效性作用。这两种结构相关的神经肽是有效的血管扩张剂，对于血压调节具有重要作用^[1]。除了血压调节外，CALCRL还参与多种关键的生物学过程，包括细胞增殖、细胞凋亡调节、血管生物学和炎症等^[2]。目前，CALCRL正在成为治疗偏头痛的新靶点^[3]。在实体瘤中，抗体介导的CALCRL信号传导抑制已被证明可以通过破坏血管生成或通过对癌细胞的直接抗增殖作用来减少肿瘤生长^[4]。同时，CALCRL也在正常的CD34+造血祖细胞中表达，CGRP和ADM可以直接作用于CD34+细胞以促进体外集落形成，这表明CALCRL在生理性骨髓生成中具有功能作用^[5]。

本品系是小鼠Calcrl基因的人源化模型。通过基因编辑技术，将小鼠Calcrl基因编码胞外结构域的序列替换为对应的人源CALCRL基因序列，从而在小鼠体内表达人源CALCRL蛋白。这种模型可用于研究血压调节、细胞增殖、细胞凋亡、血管生物学、生理性骨髓生成、炎症和肿瘤生长等多种生理病理过程的机制，以及CALCRL靶向性偏头痛药物和治疗方法的研究。该模型的纯合子是可存活且可育的。

构建方式

图1. B6-hCALCRL小鼠基因编辑打靶策略示意图。通过基因编辑技术，将小鼠内源性Calcrl基因编码蛋白细胞外结构域（aa.23~ 145）的序列替换为人CALCRL基因上对应的序列（aa.23~ 146），同时保留小鼠Calcrl基因编码蛋白信号肽（aa.1~22）的序列。

研究应用

偏头痛治疗药物开发筛选；
偏头痛治疗药物药效及安全性评价；
血管生物学和血压调节研究；
细胞增殖和细胞凋亡研究；
肿瘤生长抑制和炎症研究；
造血干/祖细胞生成分化研究。

验证数据

人源CALCRL基因表达检测

图2. 5周龄野生型小鼠（B6J）和B6-hCALCRL小鼠脾脏和肺部中人源CALCRL基因（hCALCRL）的表达情况。通过实时定量PCR（RT-qPCR）技术，使用人源CALCRL基因特异性引物，对其表达情况进行检测。结果显示，与C57BL/6J野生型小鼠相比，B6-hCALCRL小鼠的脾脏和肺部均成功表达人源CALCRL基因。

鼠源Calcrl基因表达检测

图3. 5周龄野生型小鼠（B6J）和B6-hCALCRL小鼠脾脏和肺部中鼠源Calcrl基因（mCalcrl）的表达情况。通过实时定量PCR（RT-qPCR）技术，使用鼠源Calcrl基因特异性引物，对其表达情况进行检测。结果显示，与C57BL/6J野生型小鼠相比，B6-hCALCRL小鼠的脾脏和肺部均不表达鼠源Calcrl基因。

参考文献

[1]Brain SD, Williams TJ, Tippins JR, Morris HR, MacIntyre I. Calcitonin gene-related peptide is a potent vasodilator. Nature. 1985 Jan 3-9;313(5997):54-6.

[2]Russell FA, King R, Smillie SJ, Kodji X, Brain SD. Calcitonin gene-related peptide: physiology and pathophysiology. Physiol Rev. 2014 Oct;94(4):1099- 142.

[3]Hershey AD. CGRP - The Next Frontier for Migraine. N Engl J Med. 2017 Nov 30;377(22):2190-2191.

[4]Toda M, Suzuki T, Hosono K, Hayashi I, Hashiba S, Onuma Y, Amano H, Kurihara Y, Kurihara H, Okamoto H, Hoka S, Majima M. Neuronal system-dependent facilitation of tumor angiogenesis and tumor growth by calcitonin gene-related peptide. Proc Natl Acad Sci U S A. 2008 Sep 9;105(36):13550-5.

[5]Chute JP, Muramoto GG, Dressman HK, Wolfe G, Chao NJ, Lin S. Molecular profile and partial functional analysis of novel endothelial cell-derived growth factors that regulate hematopoiesis. Stem Cells. 2006 May;24(5):1315-27.