B6-hLPA(CKI)小鼠

产品编号：C001521

品系背景：C57BL/6NCya

传代建议：纯合与纯合互配

品系描述

脂蛋白(a)（LP(a)）是一种类似于低密度脂蛋白（LDL）的颗粒，被认为是动脉粥样硬化、冠心病、中风等心血管疾病（CVD）的风险因素之一^[1]。其大小和脂质含量与LDL相似，同时含有载脂蛋白ApoB-100。不同于LDL的是，LP(a)还含有一个可变长度的载脂蛋白(a)（Apo(a)），通过单一的二硫键与ApoB-100共价结合。LP(a)在全身脂质运输中发挥着重要的作用，可以引导炎症细胞进入血管壁，导致平滑肌细胞增殖。此外，它还参与伤口愈合和组织修复，与血管壁和细胞外基质的成分相互作用^[2]。然而，LP(a)也可通过附着在动脉壁上导致动脉狭窄，加速血凝块的形成，从而引发一系列病变，与冠心病、心血管疾病、动脉粥样硬化、血栓形成和中风等疾病相关^[3]。LP(a)的血浆浓度与遗传因素密切相关，主要受LPA基因的调控，因此LPA基因是心血管疾病治疗的一个重要潜在靶点。LPA基因编码一种丝氨酸蛋白酶，可抑制组织型纤溶酶原激活剂Ⅰ的活性。该蛋白经蛋白水解产生的片段可附着在动脉粥样硬化病灶上，促进血栓形成。LPA基因在人类和非人灵长类动物中都有表达，但在小鼠中不表达。构建表达人源LPA基因的小鼠模型对降脂药物的研发、筛选和临床前评价具有重要意义，可推动心血管疾病新型疗法的研发进程。目前已有多种针对LPA基因转录速率的新型疗法正在开发中，药物类型涉及小干扰RNA（siRNA）和反义寡核苷酸（ASO）^[4]。

本品系是通过基因编辑技术在ROSA26安全位点1号内含子中敲入“loxP-Stop-loxP-hLPA”序列，获得条件性表达人LPA基因的小鼠模型。当该模型与表达Cre重组酶的工具鼠交配后，可在子代小鼠的Cre阳性细胞和组织中发生序列重组，经Cre重组酶介导的表达终止元件（LSL）删除后可特异性表达人LPA基因。B6-hLPA(CKI)小鼠可用于动脉粥样硬化、血栓性心血管疾病等研究，以及人LPA基因靶向药物的研发、筛选和临床前药理药效评价。

构建方式

图1. B6-hLPA(CKI)小鼠基因编辑打靶示意图。利用基因编辑技术，将“CAG promoter-loxP-PGK-Neo-6xSV40 pA-loxP-Kozak-Human LPA CDS-rBG pA ”序列敲入小鼠ROSA26安全位点1号内含子中。

研究应用

• 动脉粥样硬化、高血脂、血栓性心血管疾病等研究；
• 人LPA靶向药物的研发、筛选和临床前评估。

验证数据

• 人源LPA基因表达的检测

图2. 8周龄雄性B6-hLPA(CKI)小鼠（hLPA[CKI/+]）和B6-hLPA(CKI)/Alb-cre小鼠（hLPA[CKI/+],Alb-cre）*肝脏中人源LPA基因表达检测。RT-qPCR结果显示，B6-hLPA(CKI)/Alb-cre小鼠经Cre重组酶介导的表达终止元件（LSL）删除后可在肝脏中特异性表达人LPA基因，而未与Cre工具鼠交配的B6-hLPA(CKI)小鼠肝脏中不存在人LPA基因的表达。（ND：Not detected）

*B6-hLPA(CKI)/Alb-cre小鼠（产品编号：C001522）是B6-hLPA(CKI)小鼠（产品编号：C001521）与Alb-Cre小鼠（肝脏特异性Cre表达小鼠）交配而获得的在肝脏中特异性过表达人源LPA基因的小鼠。B6-hLPA(CKI)小鼠未与Alb-Cre小鼠交配前，表达终止元件（LSL）可沉默人LPA基因的表达。

• ELISA检测人源LPA蛋白的表达

图3. 8周龄雄性B6-hLPA(CKI)小鼠（hLPA[CKI/+]）和B6-hLPA(CKI)/Alb-cre小鼠（hLPA[CKI/+],Alb-cre）血清中人LPA蛋白的ELISA检测。结果显示，B6-hLPA(CKI)/Alb-cre小鼠血清中存在明显的人LPA蛋白表达，而未与Alb-Cre小鼠交配的B6-hLPA(CKI)小鼠血清中不存在人LPA蛋白表达。

参考文献

[1]Kronenberg F. Lipoprotein(a). Handb Exp Pharmacol. 2022;270:201-232.

[2]Brown MS, Goldstein JL. Plasma lipoproteins: teaching old dogmas new tricks. Nature. 1987 Nov 12-18;330(6144):113-4.

[3]Kamstrup PR, Tybjærg-Hansen A, Nordestgaard BG. Lipoprotein(a) and risk of myocardial infarction--genetic epidemiologic evidence of causality. Scand J Clin Lab Invest. 2011 Apr;71(2):87-93.

[4]Alebna, P. L., & Mehta, A. (2023, September 19). An Update on Lipoprotein(a): The Latest on Testing, Treatment, and Guideline Recommendations. American College of Cardiology. https://www.acc.org/latest-in-cardiology/articles/2023/09/19/10/54/an-update-on-lipoprotein-a