SD-CAG-EGFP大鼠 |SD-CAG-EGFP大鼠构建

产品编号：CR002

品系背景：Crl:CD(SD)

传代建议：阳性与野生型互配

品系描述

本品系类为携带增强型绿色荧光蛋白（EGFP）报告基因表达元件的报告系大鼠，EGFP蛋白的表达受CAG启动子调控^[1]。CAG启动子由鸡β-actin基因启动子、巨细胞病毒（CMV）早期增强子、兔β-actin基因剪接受体和牛球蛋白polyA信号通过修饰整合构建，以在多种哺乳动物细胞中强烈且稳定的实时基因表达而闻名，因此成为在转基因模型中驱动基因表达的热门选择，包括带有EGFP荧光报告基因的模型^[2-3]。在本品系中，CAG启动子诱导EGFP蛋白在大鼠全身组织和器官中稳定表达，可直接在激发光存在的条件下观测到EGFP蛋白发出的绿色荧光。验证数据显示，SD-CAG-EGFP大鼠的脑部、嗅球、心脏、胸腺、肺部、肝脏、脾脏、胃部、肠道、肾脏、子宫、卵巢、脂肪、肌肉、脚趾、尾部和耳朵等组织中均成功表达EGFP蛋白，因此SD-CAG-EGFP大鼠可用于大鼠细胞或组织的标记和追踪等领域的研究。此外，分离自SD-CAG-EGFP大鼠的细胞可能比通过转染EGFP质粒的野生型大鼠原代细胞更容易培养。

构建方式

通过转基因方式将CAG-EGFP线性化片段注入Crl:CD(SD)大鼠胚胎原核，获得转基因阳性大鼠。在荧光显微镜下，选择全身表达EGFP荧光的大鼠作为首建鼠，按照阳性与野生型Crl:CD(SD)大鼠交配的方式建立了SD-CAG-EGFP大鼠品系。

研究应用

SD-CAG-EGFP大鼠可用于发育生物学、细胞生物学、免疫学及神经生物学等热门研究领域的细胞或组织标记和追踪研究。

验证数据

EGFP蛋白在SD-CAG-EGFP大鼠全身组织和器官中的表达情况

图1. 增强型绿色荧光蛋白（EGFP）在SD-CAG-EGFP大鼠不同组织和器官中的表达。取SD-CAG-EGFP大鼠的脑部、嗅球、心脏、胸腺、肺部、肝脏、脾脏、胃部、肠道、肾脏、胰腺、子宫、卵巢、脂肪、肌肉、脚趾、尾部和耳朵等组织，在显微镜下观察绿色荧光的发生情况。结果显示，SD-CAG-EGFP大鼠几乎所有组织都存在强烈的绿色荧光信号。

注意事项

该报告系由转基因（TG）技术构建，无法确定EGFP表达元件在染色体上的整合位点。常规PCR鉴定方法仅能判断EGFP阳性，无法区分纯合或杂合。

参考文献

[1]Phillips GJ. Green fluorescent protein--a bright idea for the study of bacterial protein localization. FEMS Microbiol Lett. 2001 Oct 16;204(1):9-18.

[2]Okabe M, Ikawa M, Kominami K, Nakanishi T, Nishimune Y. 'Green mice' as a source of ubiquitous green cells. FEBS Lett. 1997 May 5;407(3):313-9.

[3]Li S, Chen LX, Peng XH, Wang C, Qin BY, Tan D, Han CX, Yang H, Ren XN, Liu F, Xu CH, Zhou XH. Overview of the reporter genes and reporter mouse models. Animal Model Exp Med. 2018 Apr 19;1(1):29-35.