Rpe65 KO小鼠|Rpe65基因敲除小鼠模型-赛业生物

产品编号：C001387

品系背景：C57BL/6J

繁殖：纯合×纯合

品系描述

Leber先天性黑蒙（LCA）是一组伴有严重视力受损的遗传性视网膜疾病，该疾病的主要症状是出生时或出生后数月视力丧失、眼球震颤以及视杆和视锥的光反射减弱或消失，约16%的LCA是由RPE65基因突变。由RPE65基因编码的视黄素异构酶存在于视网膜的视网膜色素上皮细胞（RPE）中，RPE65蛋白质在视觉过程中起着关键作用，是视网膜对光信号进行转换和传递的关键分子^[1]。RPE65基因的突变会导致神经视网膜和RPE细胞进一步退化，导致不可逆转的失明。已发现RPE65的多种等位基因突变会破坏视神经细胞并导致Ⅱ型Leber先天性黑蒙（LCA2）和早发严重视网膜萎缩症（EOSRD），最终导致完全失明^[1-3]。

本模型为小鼠Rpe65基因敲除模型，利用基因编辑技术敲除了人RPE65基因在小鼠体内的同源基因。小鼠Rpe65基因表达的缺失导致RPE细胞功能被破坏、光感受器细胞凋亡、视杆细胞外节膜盘排列紊乱和视杆细胞波形熄灭，引起严重的视网膜变性。

构建方式

Rpe65基因位于小鼠3号染色体上，利用基因编辑技术，敲除了该基因的Exon 2-5。

研究应用

视网膜变性（RD）研究；Leber先天性黑蒙2型（LCA2）研究；其它视网膜疾病研究。

模型验证

视网膜电图（ERG）检查

图1. 不同周龄Rpe65 KO小鼠和C57BL/6J野生型小鼠的视网膜电图（ERG）结果。与野生型对照组相比，Rpe65 KO小鼠的暗适应（Scotopic）和明适应（Photopic）ERG中a波和b波的振幅均显著下降，其中暗适应ERG几乎达到没有振幅的水平，呈现波形熄灭的状态。

视网膜光学相干断层扫描（OCT）

图2. Rpe65 KO小鼠和C57BL/6J野生型小鼠的光学相干断层扫描（OCT）结果。与对照组小鼠（C57BL/6J）相比，Rpe65 KO小鼠光感受器细胞凋亡且视杆细胞外节膜盘排列紊乱。

结果讨论

通过视网膜电图（ERG）和光学相干断层扫描（OCT）对Rpe65 KO小鼠和野生型小鼠进行视网膜病理评价，结果显示：与野生型小鼠相比，Rpe65 KO小鼠表现为RPE细胞功能被破坏、光感受器细胞凋亡、视杆细胞外节膜盘排列紊乱和视杆细胞波形熄灭，总体呈现为严重的视网膜变性。

综上，Rpe65 KO小鼠是一个严重型的视网膜变性模型，可用于后续的视网膜色素变性（RP）和其它视网膜疾病的研究，为人类疾病的研究提供有效的工具。

参考文献

[1] Chao DL, Burr A, Pennesi M. RPE65-Related Leber Congenital Amaurosis / Early-Onset Severe Retinal Dystrophy. 2019 Nov 14. In: Adam MP, Everman DB, Mirzaa GM, Pagon RA, Wallace SE, Bean LJH, Gripp KW, Amemiya A, editors. GeneReviews® [Internet]. Seattle (WA): University of Washington, Seattle; 1993–2023.

[2] Pang JJ, Chang B, Hawes NL, Hurd RE, Davisson MT, Li J, Noorwez SM, Malhotra R, McDowell JH, Kaushal S, Hauswirth WW, Nusinowitz S, Thompson DA, Heckenlively JR. Retinal degeneration 12 (rd12): a new, spontaneously arising mouse model for human Leber congenital amaurosis (LCA). Mol Vis. 2005 Feb 28;11:152-62.

[3] Hartong DT, Berson EL, Dryja TP. Retinitis pigmentosa. Lancet. 2006 Nov 18;368(9549):1795-809.