B6-hINHBE小鼠

产品编号：C001533

品系全称：C57BL/6NCya-Inhbe^tm1(hINHBE)/Cya

品系背景：C57BL/6NCya

传代建议：纯合与纯合互配

品系描述

抑制素βE亚基（INHBE）是转化生长因子-β（TGF-β）超家族的一员，它在肝细胞中高度特异性地表达。INHBE的前蛋白经过蛋白水解处理后生成抑制素β亚基，这种蛋白与细胞增殖、凋亡、免疫反应和激素分泌等多种细胞过程有关。在肥胖和糖尿病的发展过程中，INHBE蛋白的表达会抑制胰腺和肝脏中相关细胞的增殖和生长。研究发现，INHBE在肝脏中的表达与人体的胰岛素抵抗和体重指数（BMI）呈正相关，这表明INHBE可能是在肥胖胰岛素抵抗条件下改变全身代谢状态的一种肝脏因子 ^[1]。2022年，Alnylam Pharmaceuticals和再生元遗传学中心（RGC）的研究揭示了INHBE与脂肪调节的密切关系。研究显示，INHBE罕见的蛋白功能缺失（LOF）可能通过促进健康的脂肪储存来保护肝脏免受炎症、血脂异常和Ⅱ型糖尿病的影响。携带此类突变的患者的脂肪分布更正常，腹部脂肪明显减少，代谢状况良好，罹患心血管疾病和Ⅱ型糖尿病的风险显著降低 ^[2-4]。这些结果表明，INHBE是一种肝脏特异性表达的脂肪贮存负调控因子，抑制INHBE基因和蛋白的表达可能是治疗与脂肪分布和储存不当相关代谢性疾病的一种潜在的策略。因此，目前包括Alnylam Pharmaceuticals、Arrowhead Pharmaceuticals和Wave Life Sciences在内的多家小核酸药企正在开发针对INHBE的RNA干扰（RNAi）药物，用于治疗肥胖症等疾病 ^[5-7]。

RNA干扰药物（RNAi）主要包括小干扰RNA（siRNA）和反义寡核苷酸（ASO）。siRNA通过靶向并降解特定基因的mRNA，而ASO则通过与目标mRNA结合，阻止其被翻译成蛋白质或诱导其降解，从而抑制目的基因的表达。考虑到人类和动物在基因上的差异，将小鼠基因进行人源化修饰将有助于加速靶向人源INHBE基因的RNAi疗法进入临床阶段。本品系是小鼠Inhbe基因人源化模型，可用于研究靶向INHBE的肥胖症等疾病的疗法。纯合B6-hINHBE小鼠具有良好的生存和繁殖能力。此外，基于自主研发的TurboKnockout融合BAC重组的技术创新，赛业生物还可提供基于该模型构建的热门点突变模型，也可针对不同点突变提供定制服务以满足广大研发人员的药效学等实验需求。

构建方式

图1. B6-hINHBE小鼠基因编辑打靶示意图。使用TurboKnockout打靶技术将小鼠Inhbe基因中从ATG起始密码子到3'UTR的碱基序列替换为人INHBE基因中的对应序列，即人源化区域包括了整个INHBE基因的编码序列和3'UTR区域。

研究应用

• 肥胖与脂肪分布和储存不当相关代谢性疾病的研究；
• 人源INHBE靶向疗法开发研究。

验证数据

• 人源INHBE基因和鼠源Inhbe基因表达的检测

图2. 6周龄纯合B6-hINHBE小鼠和野生型小鼠（WT）肝脏中人源INHBE基因和鼠源Inhbe基因表达检测。通过RT-qPCR检测野生型小鼠与B6-hINHBE小鼠中人源INHBE基因和鼠源Inhbe基因的表达，结果显示在雌性和雄性B6-hINHBE小鼠的肝脏中均存在人源INHBE基因的显著表达，而野生型小鼠体内不存在人源INHBE基因表达；在野生型小鼠肝脏中存在鼠源Inhbe基因的表达，而B6-hINHBE小鼠体内则不存在鼠源Inhbe基因的表达。

ND：Not detected（未检测到）

• 人源INHBE蛋白表达的检测

图3. 6周龄纯合B6-hINHBE小鼠和野生型小鼠（WT）血清中人源INHBE蛋白表达的Western blot检测结果*。结果显示，雌性和雄性B6-hINHBE小鼠血清中均存在人源INHBE蛋白显著表达。此外，由于该检测抗体可能交叉识别人和小鼠INHBE蛋白，因此在野生型小鼠样本中也检测到INHBE阳性条带。

*本检测所使用的INHBE抗体来自Novus Biologicals，产品编号为H00083729-B01P。

参考文献

[1]Sugiyama M, Kikuchi A, Misu H, Igawa H, Ashihara M, Kushima Y, Honda K, Suzuki Y, Kawabe Y, Kaneko S, Takamura T. Inhibin βE (INHBE) is a possible insulin resistance-associated hepatokine identified by comprehensive gene expression analysis in human liver biopsy samples. PLoS One. 2018 Mar 29;13(3):e0194798.

[2]Akbari P, Sosina OA, Bovijn J, Landheer K, Nielsen JB, Kim M, Aykul S, De T, Haas ME, Hindy G, Lin N, Dinsmore IR, Luo JZ, Hectors S, Geraghty B, Germino M, Panagis L, Parasoglou P, Walls JR, Halasz G, Atwal GS; Regeneron Genetics Center; DiscovEHR Collaboration; Jones M, LeBlanc MG, Still CD, Carey DJ, Giontella A, Orho-Melander M, Berumen J, Kuri-Morales P, Alegre-Díaz J, Torres JM, Emberson JR, Collins R, Rader DJ, Zambrowicz B, Murphy AJ, Balasubramanian S, Overton JD, Reid JG, Shuldiner AR, Cantor M, Abecasis GR, Ferreira MAR, Sleeman MW, Gusarova V, Altarejos J, Harris C, Economides AN, Idone V, Karalis K, Della Gatta G, Mirshahi T, Yancopoulos GD, Melander O, Marchini J, Tapia-Conyer R, Locke AE, Baras A, Verweij N, Lotta LA. Multiancestry exome sequencing reveals INHBE mutations associated with favorable fat distribution and protection from diabetes. Nat Commun. 2022 Aug 23;13(1):4844.

[3]Deaton AM, Dubey A, Ward LD, Dornbos P, Flannick J; AMP-T2D-GENES Consortium; Yee E, Ticau S, Noetzli L, Parker MM, Hoffing RA, Willis C, Plekan ME, Holleman AM, Hinkle G, Fitzgerald K, Vaishnaw AK, Nioi P. Rare loss of function variants in the hepatokine gene INHBE protect from abdominal obesity. Nat Commun. 2022 Jul 27;13(1):4319.

[4]Adam RC, Pryce DS, Lee JS, Zhao Y, Mintah IJ, Min S, Halasz G, Mastaitis J, Atwal GS, Aykul S, Idone V, Economides AN, Lotta LA, Murphy AJ, Yancopoulos GD, Sleeman MW, Gusarova V. Activin E-ACVR1C cross talk controls energy storage via suppression of adipose lipolysis in mice. Proc Natl Acad Sci U S A. 2023 Aug 8;120(32):e2309967120.

[5]Arrowhead Pharmaceuticals. (2024). Arrowhead Pharmaceuticals Reports Fiscal 2024 First Quarter Results. Retrieved April 5, 2024, from https://arrowheadpharma.com/news-press/arrowhead-pharmaceuticals-reports-fiscal-2024-first-quarter-results-2/

[6]Alnylam Pharmaceuticals. (2024). Harnessing Human Genetics to Power the Next Wave of RNAi Therapeutics. Retrieved April 5, 2024, from https://news.alnylam.com/rnai/articles/harnessing-human-genetics-power-next-wave-rnai-therapeutics

[7]Wave Life Sciences. (2024). Research and Development. Retrieved April 5, 2024, from https://wavelifesciences.com/pipeline/research-and-development/