简介
C-NKG小鼠是赛业生物在NOD-Scid背景品系上敲除Il2rg基因自主研发的一种重度免疫缺陷小鼠。C-NKG小鼠缺乏成熟的T、B、NK免疫细胞,补体活性降低,巨噬细胞对人源细胞吞噬作用弱,可高效地移植人造血干细胞(HSC)、外周血单核细胞(PBMC),患者来源的异种移植物(PDX)或成体干细胞和组织,是目前公认的免疫缺陷程度高且可用于肿瘤、免疫、自身免疫性疾病、免疫治疗疫苗、GvHD/移植、安全性评估等研究的优秀模型。
品系特点
研究应用
模型验证
图1. Prkdcscid突变是由Prkdc基因84号外显子中的TAT→TAA产生的,
基因测序结果表明,C-NKG小鼠携带有Prkdcscid突变。
图2. 对C-NKG小鼠Il2rg基因进行PCR检测,结果表明C-NKG小鼠Il2rg基因成功敲除。
野生型条带大小:1430bp;敲除部分片段条带大小:388bp。
图3. C-NKG小鼠外周血中的B、T、NK细胞严重缺失,为重度免疫缺陷鼠。
取BALB/c、C-NKG小鼠的外周血,对其T、B和NK细胞的组成进行代表性流式细胞免疫表型分析及统计对比。结果表明,与BALB/c小鼠相比,C-NKG小鼠外周血中的B细胞(CD3-CD19+)、T细胞(CD3+CD19-)、辅助性T细胞(CD3+CD4+CD8-)、细胞毒性T细胞(CD3+CD4-CD8+)、NK细胞(CD335+CD3-)几乎完全缺失。
图4. C-NKG小鼠脾脏组织中的B、T、NK细胞严重缺失,为重度免疫缺陷鼠。
取BALB/c、C-NKG小鼠的脾脏组织,对其T、B和NK细胞的组成进行代表性流式细胞免疫表型分析及统计对比。结果表明,与BALB/c小鼠相比,C-NKG小鼠脾脏组织中的B细胞(CD3-CD19+)、T细胞(CD3+CD19-)、辅助性T细胞(CD3+CD4+CD8-)、细胞毒性T细胞(CD3+CD4-CD8+)、NK细胞(CD335+CD3-)几乎完全缺失。
图5. huPBMC-C-NKG小鼠生存曲线。
huPBMC-C-NKG小鼠随着移植物抗宿主病(GvHD)的出现而逐渐发生死亡。
图6. 人源PBMC移植C-NKG小鼠后外周血中人源CD45+细胞的含量变化。
PBMC移植后C-NKG小鼠外周血中人源白细胞的含量逐渐增加,3w后CD45+的平均比例在50%左右。
图7. 人源PBMC移植C-NKG小鼠后外周血中人源CD3+细胞的含量变化。
huPBMC-C-NKG小鼠重建以T细胞为主。
图8. C-NKG小鼠注射CD34细胞后检测到高水平的hCD45细胞,其中主要以人源B细胞重建为主,人源T细胞随着重建时间增长而增加,同时可见少量人源NK细胞。
图9. 人肝癌细胞Huh7皮下异种移植肿瘤生长曲线
图10. 人胃癌细胞HGC-27皮下异种移植肿瘤生长曲线
图11. 人结直肠癌细胞SW620皮下异种移植肿瘤生长曲线
将细胞以皮下注射的形式接种到C-NKG、NOD/Scid小鼠体内,并在不同的时间点测量成瘤体积。细胞接种量为5x106/只,数据以Mean±SEM形式呈现。结果显示,人肝癌细胞Huh7、人胃癌细胞HGC-27和人结直肠癌细胞SW620在C-NKG小鼠上均能有效地建立肿瘤模型。