FVB-HTT KI(nQ) 小鼠|FVB-HTT KI(nQ) 小鼠构建|亨廷顿症小鼠

产品编号：C001404

品系背景：FVB

传代建议：纯合与纯合互配

品系描述

亨廷顿（Huntingtin, HTT）是一种与亨廷顿舞蹈症（Huntington's disease, HD）相关的疾病基因，HTT基因在包括中枢神经系统在内的全身各组织器官中广泛表达，是机体正常发育所必需的。HTT基因编码区5'端附近含有一段多态性的三核苷酸（胞嘧啶-腺嘌呤-鸟嘌呤, CAG）重复序列，在翻译过程中形成聚谷氨酰胺（polyQ）。亨廷顿舞蹈症是一种以纹状体神经元丢失为特征的神经退行性疾病，是由HTT基因中三核苷酸（CAG）重复序列的错误表达引起的，当CAG重复大于35时会导致polyQ异常扩增，直接导致HTT蛋白片段错误折叠，与大量蛋白质异常互作并积聚在细胞核和神经终末，从而影响神经传导、细胞内蛋白运输和线粒体功能等，最终导致神经功能失调和退化^[1]。目前并没有可以有效预防或治疗亨廷顿舞蹈症的药物或方法，亨廷顿舞蹈症的机制研究和药物及治疗方法开发仍有较大需求^[2]。

本品系是人源HTT基因（hHTT）敲入模型，通过基因编辑技术，将携带超过100个CAG重复的突变人源HTT基因序列敲入到小鼠体内。据报道携带该类突变的小鼠表现为亨廷顿舞蹈症的病理特征及功能障碍表型，可用于亨廷顿舞蹈症治疗药物的开发筛选及安全性评价^[3]。基因和蛋白表达的检测数据显示该模型可成功表达突变的人源HTT基因和蛋白。

构建方式

通过基因编辑技术，将人源启动子驱动的携带超过100个CAG重复的突变人源HTT基因1号外显子区域序列敲入到小鼠Htt基因Exon 1上。

图1. FVB-HTT KI(nQ)小鼠基因编辑打靶策略示意图

研究应用：亨廷顿舞蹈症治疗药物开发和筛选、药物药效和安全性评价、疾病机制等研究。

验证数据

人源HTT基因的表达检测

图2. FVB野生型小鼠（WT）和FVB-HTT KI(nQ) 小鼠不同组织中人源HTT基因的表达检测。利用人源HTT基因特异性引物，通过qPCR检测野生型小鼠和FVB-HTT KI(nQ)小鼠不同组织中人源HTT基因的表达。结果显示，在FVB-HTT KI(nQ)小鼠的大脑、肾脏、眼球和心脏中均存在人源HTT基因的表达。

人源HTT蛋白的表达检测

图3. FVB野生型小鼠（WT）和FVB-HTT KI(nQ) 小鼠不同组织中人源HTT蛋白的表达检测。通过Western Blot检测野生型小鼠和FVB-HTT KI(nQ)小鼠不同组织中人源HTT蛋白的表达。结果显示，在FVB-HTT KI(nQ)小鼠的大脑、肾脏和眼球中均存在人源HTT蛋白（hHTT）的表达，其中脑部和眼部的HTT蛋白表达最为明显。

结果讨论

通过qPCR和Western Blot对野生型对照小鼠和FVB-HTT KI(nQ) 小鼠体内不同组织的人源HTT基因和蛋白的表达进行检测，结果显示，在野生型小鼠中不存在人源HTT和蛋白的表达，而在FVB-HTT KI(nQ) 小鼠的大脑、眼部和肾脏可检测到人源HTT基因和蛋白的广泛表达。

综上所述，该模型成功在小鼠体内表达人源HTT基因和蛋白，可用于亨廷顿舞蹈症（HD）的机制和治疗药物的开发筛选及安全性评价等方面的研究。

参考文献

[1] Walker FO. Huntington's disease. Lancet. 2007 Jan 20;369(9557):218-28.

[2] McColgan P, Tabrizi SJ. Huntington's disease: a clinical review. Eur J Neurol. 2018 Jan;25(1):24-34.

[3] Crook ZR, Housman D. Huntington's disease: can mice lead the way to treatment? Neuron. 2011 Feb 10;69(3):423-35.